大鼠抵抗素检测试剂盒,RETN试剂盒操作注意事项

1试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。　

实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。

2不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。

3使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。

4使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。

5洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。

6底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。

7加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。

8按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。

大鼠抵抗素检测试剂盒,RETN试剂盒标准品稀释（如下图）1.按照C of A说明使用检测稀释液配制浓度为500pg/ml 的标准品溶液。

2.在高亲和ELISA板子中从B1和B2开始到H1和H2每孔分别加入100ul检测稀释液。

3.取200ul的浓度为500pg/ml的标准品加入到A1和A2两个孔中。

4.用排枪从A1和A2两个孔中吸取100ul加入到对应的B1和B2中，吹吸混合均匀，那么 B1和B2标准品浓度为250pg/ml。

5.从B1和B2中吸取100ul加入到C1和C2孔中，混匀，那么C1和C2孔标准品浓度为125pg/ml。

6.按照步骤4和5的方法倍比稀释到H1和H2两孔。H1和H2孔中标准品的浓度是4pg/ml，体积为200ul，取100ul弃掉。届时每个孔标准品的体积均为100ul。

注意：4到6步骤稀释速度要快，避免时间过长，建议使用多通道排枪进行。

7.设置A3和A4为空白对照（只加100ul稀释液），为了避免胡克效应的影响，我们建议可以采用A1和A12作为空白对照孔，而不设置样品或标准品。

大鼠抵抗素检测试剂盒,RETN试剂盒技术原理：以免疫学反应为基础，将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合起来.

1. 抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。

2. 结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性。

3. 酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性，又保留酶的活性。

4. 受检标本与固相载体表面的抗原或抗体起反应。再加入酶标记 的抗原或抗体，也通过反应而结合在固相载体上。

5. 此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。

6. 大鼠抵抗素检测试剂盒,RETN试剂盒加入酶反应的底物后，底物被酶催化成为有色产物，产物的量 与标本中受检物质的量直接相关，故可根据呈色的深浅进行定 性或定量分析。测定方法具有很高的敏感度（pg-ng/ml水 平），并且重复性好。