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细胞名称:NCI-H2227 人小细胞肺癌细胞
培养条件:DMEM:F12+0.005mg/mL 胰岛素+0.01mg/mL 转铁蛋白+30nM 亚砷酸钠+10nM 氢化可的松+10nM β-雌二醇+extra 2mM L-谷氨酰胺 (for final conc. of 4.5mM)+5% FBS
形 态:既有悬浮生长,又有贴壁生长
背 景:该细胞是1989年8月从一名54岁白人男性小细胞肺癌皮肤转移灶中分离得到的。
NCI-H2227细胞;人小细胞肺癌细胞传代后不贴壁了,成团浮在培养基里,怎么办?细胞,落层生长后,消化传代,可能细胞密度大,吹打的时候有一些细胞还是成团的,可是大部分已经成单个的了,24小时后观察,细胞都成团了,不贴壁,应该没有污染。现在怎么办?重新吹打能散开吗?
技术回答:NCI-H2227细胞;人小细胞肺癌细胞密度过大细胞老化了,消化后聚团不贴壁说明细胞状态不好,建议重新复苏细胞。如果不甘心可以重新吹散了试试看,不过估计贴壁的也很少。可以低俗离心把状态不好的聚团细胞去除,然后把上层液体里面的细胞转移至6孔板或者24孔板培养,具体根据最后分散细胞的数量来哦~
重新吹打了NCI-H2227细胞;人小细胞肺癌细胞,还是有很多贴壁的细胞,可是还是有好多细胞碎片浮着,换了液还是有好多浮着。另外,培养瓶老是弄不均匀,就瓶子的四边都很密集,其他就很均匀,不知道会不会影响细胞状态?
技术回答:密集的地方容易老化,对NCI-H2227细胞;人小细胞肺癌细胞整体状态还是会有影响的~ 得想办法让传代的细胞均匀分布。传代完后做一下前后左右的十字运动~
细胞处理:细胞如果裂解后,RNA在普通环境下会很快降解。想要不降解,可以考虑:1.加T-Zol裂解液,-80度保存;2.分选后按细胞冻存步骤冻存,存于-80度,应该能放3-6个月。
NCI-H2227细胞;人小细胞肺癌细胞培养:图片聚焦没聚准,聚团现象不是很严重,状态看着也还行。悬浮细胞对血清要求较高,可以考虑换好点的血清看看。
小鼠心肌成纤维细胞1原代8-4/2-5ADMEM+10%FBS
小鼠肝细胞(上皮)1原代8-4/3-1A上皮培养基+2%FBS
大鼠心肌成纤维3原代8-4/3-3,3-4ADMEM/F12+10%FBS
大鼠肾小管上皮细胞2原代8-4/3-5,4-1A上皮培养基+2%FBS
大鼠脑神经元1原代8-4/4-2ADMEM+B27+N2
大鼠关节软骨2原代8-4/4-3,4-4ADMEM/F12+10%FBS
Hum-160302-PBMC F2 P22原代8-4/4-5,5-1SDMEM/F12+10%FBS
Hum-160302-PBMC F1 P12原代8-4/5-2,5-3SDMEM/F12+10%FBS
小鼠真皮成纤维细胞1原代8-4/3-2ADMEM/F12+10%FBS
IPS P11 缓冻1原代12-5/1-1APSCeasy完全培养基
IPS P12 速冻1原代12-5/1-4APSCeasy完全培养基
Hum-160302-MSC8原代8-3/1-1~2-3ADMEM低糖+10%FBS
Hum-16030901-单核细胞4原代8-3/2-4,2-5,3-1,3-2SDMEM/F12+10%FBS
Hum-16030901-滑膜3原代8-3/3-3,3-4,3-5组织
Hum-16030901-骨组织3原代8-3/4-1,4-2,4-3组织
Hum-16030201-间充质干细胞2原代8-3/5-1,5-2ADMEM/F12+10%FBS
Hum-16031601-韧带2原代8-3/5-3,5-4组织
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