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细胞名称:3T6-Swiss albino 小鼠胚胎成纤维细胞
组织来源:胚胎
培养条件:DMEM +10% FBS
形 态:贴壁;成纤维细胞
背 景:3T6细胞株是1963年由Todaro G和Green H从分离的瑞士小鼠胚胎中建立的,能分泌胶原和透明质酸;检测表明,鼠痘病毒阴性。
3T6-SWISS ALBINO细胞;小鼠胚胎成纤维细胞传代后不贴壁了,成团浮在培养基里,怎么办?细胞,落层生长后,消化传代,可能细胞密度大,吹打的时候有一些细胞还是成团的,可是大部分已经成单个的了,24小时后观察,细胞都成团了,不贴壁,应该没有污染。现在怎么办?重新吹打能散开吗?
技术回答:3T6-SWISS ALBINO细胞;小鼠胚胎成纤维细胞密度过大细胞老化了,消化后聚团不贴壁说明细胞状态不好,建议重新复苏细胞。如果不甘心可以重新吹散了试试看,不过估计贴壁的也很少。可以低俗离心把状态不好的聚团细胞去除,然后把上层液体里面的细胞转移至6孔板或者24孔板培养,具体根据最后分散细胞的数量来哦~
重新吹打了3T6-SWISS ALBINO细胞;小鼠胚胎成纤维细胞,还是有很多贴壁的细胞,可是还是有好多细胞碎片浮着,换了液还是有好多浮着。另外,培养瓶老是弄不均匀,就瓶子的四边都很密集,其他就很均匀,不知道会不会影响细胞状态?
技术回答:密集的地方容易老化,对3T6-SWISS ALBINO细胞;小鼠胚胎成纤维细胞整体状态还是会有影响的~ 得想办法让传代的细胞均匀分布。传代完后做一下前后左右的十字运动~
细胞处理:细胞如果裂解后,RNA在普通环境下会很快降解。想要不降解,可以考虑:1.加T-Zol裂解液,-80度保存;2.分选后按细胞冻存步骤冻存,存于-80度,应该能放3-6个月。
3T6-SWISS ALBINO细胞;小鼠胚胎成纤维细胞培养:图片聚焦没聚准,聚团现象不是很严重,状态看着也还行。悬浮细胞对血清要求较高,可以考虑换好点的血清看看。
Cell Culture Reagents
OsrHSA rHSA重组人血清白蛋白Recombinant Human Serum Albumin1 g
0010FBS胎牛血清Fetal Bovine Serum, Human Cell Tested10 ml
0025FBS胎牛血清Fetal Bovine Serum, Human Cell Tested25 ml
0103T/E胰酶/EDTA消化液Trypsin/EDTA solution100 ml
0113TNS胰酶中和液Trypsin Neutralization Solution100 ml
0113-sfTNS-sf 胰酶中和液-无血清TNS-sf (Trypsin Neutralization Solution-serum free)100 ml
0123ECDS非酶细胞裂解液Enzyme-Free Cell Dissociation Solution100 ml
0133CFM细胞冻存液Cell Freezing Medium50 ml
0143SF-CFM无血清细胞冻存液 Serum-Free Cell Freezing Medium50 ml
0153StemCryo人胚胎干细胞冻存液Human Pluripotent Stem Cell Cryopreservation Medium50ml
0163StemCryo人胚胎干细胞冻存液Human Pluripotent Stem Cell Cryopreservation Medium,5 x 10mL
0173STI大豆胰蛋白酶抑制剂Soybean Trypsin Inhibitor50ml
0203TB台盼蓝Trypan Blue, 0.4%50 ml
0303DPBS磷酸盐缓冲液 Dulbecco’s Phosphate-Buffered Saline500 ml
0313HBSS平衡盐溶液 Hank's Balanced Salt Solution500 ml
0403PLL多聚赖氨酸 Poly-L-Lysine 1 mg/ml1 ml
0413PLL多聚赖氨酸 Poly-L-Lysine 10 mg/ml1 ml