产品详情
DNA释放剂
英文名称:
运输:常温
保存:常温
有效期:1年
货期:1-2天
其他:
产品介绍:
从各种材料中释放DNA作为PCR模板,不需提取
产品及特点
本产品是可以直接用新鲜的动物、植物、细菌样品制备可以直接进行 PCR、LAMP
扩增的模板,它具有下列特点:
1. 操作简单,免去 DNA 提取、蛋白去除、RNA 去除等步骤,15 分钟即得用于 PCR
或 LAMP 扩增的 DNA 模板,一个实验员每天可以筛选上千个样品,尤其适用于大
规模育种筛选和临床筛选。
2. 兼容性广,可以用于几乎所有的分子生物学样品,包括细菌、昆虫、真菌、各种植
物、各种动物、法医样品(包括全血液、血痕、精斑、唾液、毛发、组织样品、口
腔细胞和 FTA 卡)、石蜡组织切片等。
3. 成本低廉,在大规模筛选时能节约成本。
4. 环保健康,不使用任何有毒有害的试剂。
5. 本试剂盒足够处理 400 份样品,足够 400 次 PCR 或 LAMP 扩增。本试剂盒不提
供扩增试剂盒。
运输及保存 常温运输,溶液 A 成分一和成分二、溶液 B 可以常温放置。有效期一年。
自备试剂 PCR 试剂、LAMP 试剂或其他扩增试剂,超纯水
使用方法 1. 配制溶液 A 工作液。以配制 1mL 工作液(足够 10 个样品)为例:在一干净塑料
管中加入 10uL 溶液 A 成分一,20uL 溶液 A 成分二和 970uL 超纯水,充分混合
均匀即可。溶液 A 工作液可室温放置,在一周内用完,不要长期放置。一
次检测一个样品需要 100uL 溶液 A 工作液,1mL 工作液足够 10 个样品。如果待
测样品数量为其他数字,配制的溶液 A 工作液的体积需要做相应的调整。
2. 根据材料不同参考下表取少量样品到一干净的塑料离心管中。
组织使用量不要超过 0.5mg。
3. 加入 100 uL 溶液 A 工作液,确保固体样品被溶液淹埋,如果是液体样品则震荡
混匀。
4. 95℃保温 10 分钟。
5. 待冷却到常温后加入 10uL 溶液 B 并混匀得 DNA 释放液。这些 DNA 释放液足够
进行 50-100 次 PCR 或 LAMP 扩增。
6. 直接用 DNA 释放液作为模板设置 30 uL 体系的 PCR 反应体系如下:
注意:DNA 释放液体积不要超过 PCR 体积的 1/10。
7. 放入 PCR 仪中进行 PCR,PCR 参数需要根据引物 Tm 值和靶分子长度等参数设
置。一般不低于 35 次循环。
8. PCR 结束后取 5-10 uL 直接上样电泳(本产品不需要上样液即可直接上样),红
色染料电泳速度相当于 50 bp DNA 片段。
9. 如果没有预期的扩增,细胞裂解液中可能是有 PCR 抑制剂(植物、土壤和血液等
DNA 样品常含此类抑制物),建议把细胞裂解液分别稀释 10 倍和 100 倍再用 3uL
进行 PCR 扩增。也可以在 PCR 体系中加入 1/10 的本公司的 PCR 抑制物清除剂
30uL 体系中加 3uL。需要另购,可能会对 PCR 有帮助。