产品详情
pGFP-HBx病毒基因质粒
基本信息
质粒标签: N-EGFP,C-HA
原核抗性: 卡那霉素Kan
筛选标记: 遗传霉素G418
克隆菌株: 大肠杆菌DH5α
培养条件: LB培养基,37℃,有氧
表达宿主: 哺乳细胞
质粒简介
pGFP-HBx质粒是一个病毒基因哺乳细胞表达质粒,CMV启动子驱动EGFP和HBX基因(HBV来源)和HA标签一起融合表达。
质粒图谱
pGFP-HBx病毒基因质粒使用说明:
1、收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min,再加入20μl无菌水溶解质粒,室温放置1min;
2、从-80℃冰箱中取出相应的感受态,置于冰盒上解冻,并做好标记;
3、取2μl质粒加至100μl感受态中,冰浴30min;
4、42℃热激90s,再冰浴2min;
5、加入900μl无抗的LB液体培养基,180rpm震荡培养45min;
6、6000rpm离心5min,仅留100ul上清混匀菌体沉淀;
7、混匀后的菌液加至对应抗性的LB平板上,倒入适量玻璃珠,涂匀液体;
8、将平板正向培养1h,再倒置培养12h~16h;
9、挑取单克隆菌落至对应抗性的LB液体培养基中,震荡培养12h~16h,根据实验需要提取质粒。
pGFP-HBx病毒基因质粒注意事项:
1、如果您收到的是甘油菌种,请先四区划线,挑取单克隆培养。
2、如果第二天转化平板长的过多,请将质粒按比例稀释后再转化。