pHelper腺相关病毒包装质粒

基本信息

复制子: pUC ori，f1 ori

质粒分类: 腺相关病毒包装质粒

质粒大小: 11635bp

原核抗性: 氨苄青霉素Amp

克隆菌株: 大肠杆菌Stbl3

培养条件: 37℃，有氧，LB

表达宿主: 哺乳细胞

5'测序引物: 根据序列设计引物

3'测序引物: 根据序列设计引物

质粒简介

        pHelper质粒是一个腺相关病毒骨架包装质粒，可与pAAV-MCS和pAAV-RC2共同包装成腺相关病毒。

      This 11.6 KB vector carries the adenovirus genes (E2A E4 and VA RNAs required inducing the lytic) for phase of AAV. This vector is cotransfected into the packaging cell line to produce recombinant replication-deficient AAV virions., it is related to packaging adenovirus vector with ampicillin resistance.

质粒图谱

pHelper腺相关病毒包装质粒使用说明：

     1、收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl无菌水溶解质粒，室温放置1min；

     2、从-80℃冰箱中取出相应的感受态，置于冰盒上解冻，并做好标记；

     3、取2μl质粒加至100μl感受态中，冰浴30min；

     4、42℃热激90s，再冰浴2min；

     5、加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡培养45min；

     6、6000rpm离心5min，仅留100ul上清混匀菌体沉淀；

     7、混匀后的菌液加至对应抗性的LB平板上，倒入适量玻璃珠，涂匀液体；

     8、将平板正向培养1h，再倒置培养12h~16h；

     9、挑取单克隆菌落至对应抗性的LB液体培养基中，震荡培养12h~16h，根据实验需要提取质粒。

pHelper腺相关病毒包装质粒注意事项：

      1、如果您收到的是甘油菌种，请先四区划线，挑取单克隆培养。

      2、如果第二天转化平板长的过多，请将质粒按比例稀释后再转化。