pCAMBIA0380植物表达质粒

基本信息

启动子: 无

复制子: pVS1 oriV，ori

终止子: NOS terminator

质粒大小: 6813bp

质粒标签: C-6xHis

原核抗性: 卡那霉素Kan

克隆菌株: 大肠杆菌DH5α

培养条件: 37℃，有氧，LB

表达宿主: 植物

5'测序引物: 根据序列设计引物

3'测序引物: 根据序列设计引物

质粒简介

        The pCambia vector backbone is derived from the pPZP vectors.

        The pCambia0380 vector offers:

               · High copy number in E.coli for high DNA yields

                · pVS1 replicon for high stability in Agrobacterium

               · Small size

                · Restriction sites designed for modular plasmid modifications and small but adequate poly-linkers for introducing your DNA of interest

                · Bacterial selection with kanamycin

        This vector contains a range of restriction sites on either side of the pUC8 polylinker, making it suitable for advanced construction purposes with users inserting their own promoters, selection genes, reporter genes. The only functional signals between the T-DNA borders are the start and stop codons, the histidine tag, and the NOS-poly(A) signal.

质粒图谱

pCAMBIA0380植物表达质粒使用说明：

     1、收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl无菌水溶解质粒，室温放置1min；

     2、从-80℃冰箱中取出相应的感受态，置于冰盒上解冻，并做好标记；

     3、取2μl质粒加至100μl感受态中，冰浴30min；

     4、42℃热激90s，再冰浴2min；

     5、加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡培养45min；

     6、6000rpm离心5min，仅留100ul上清混匀菌体沉淀；

     7、混匀后的菌液加至对应抗性的LB平板上，倒入适量玻璃珠，涂匀液体；

     8、将平板正向培养1h，再倒置培养12h~16h；

     9、挑取单克隆菌落至对应抗性的LB液体培养基中，震荡培养12h~16h，根据实验需要提取质粒。

pCAMBIA0380植物表达质粒注意事项：

      1、如果您收到的是甘油菌种，请先四区划线，挑取单克隆培养。

      2、如果第二天转化平板长的过多，请将质粒按比例稀释后再转化。