产品详情
pGM1190链霉菌表达质粒
基本信息
启动子: TipA promoter
质粒大小: 7089bp
质粒标签: N-6xHis/thrombin site/T7 tag,C-6xHis
原核抗性: 安普霉素Apr
克隆菌株: 大肠杆菌DH5α
培养条件: 有氧,LB,37℃
表达宿主: 链霉菌
质粒简介
pGM1190是一个链霉菌表达载体,通过TipA 启动子驱动目的基因的表达。转化进链霉素的时候请用35℃的温度培养。OriT containing mobilizable vector for thiostrepton induced gene expression in Streptomyces,replicates also in Streptomyces (below 35°C).
质粒图谱
pGM1190链霉菌表达质粒使用说明:
1、收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min,再加入20μl无菌水溶解质粒,室温放置1min;
2、从-80℃冰箱中取出相应的感受态,置于冰盒上解冻,并做好标记;
3、取2μl质粒加至100μl感受态中,冰浴30min;
4、42℃热激90s,再冰浴2min;
5、加入900μl无抗的LB液体培养基,180rpm震荡培养45min;
6、6000rpm离心5min,仅留100ul上清混匀菌体沉淀;
7、混匀后的菌液加至对应抗性的LB平板上,倒入适量玻璃珠,涂匀液体;
8、将平板正向培养1h,再倒置培养12h~16h;
9、挑取单克隆菌落至对应抗性的LB液体培养基中,震荡培养12h~16h,根据实验需要提取质粒。
pGM1190链霉菌表达质粒注意事项:
1、如果您收到的是甘油菌种,请先四区划线,挑取单克隆培养。
2、如果第二天转化平板长的过多,请将质粒按比例稀释后再转化。