产品详情
RNA电泳液(又名MOPS电泳液),10×
产品及特点 本产品是预配的 10 X RNA 专用电泳液(即 10 X MOPS 电泳液),专门用于
RNA 电泳分析。
1. 即开即用,用户不需要自己进行 RNase 灭活、高压灭菌、pH 调节等操作。
2. 与 Northern 杂交等后续反应兼容。
规格及成分 成 份 编 号 100 mL 包装 250 mL 包装
RNARUN 3150 100 mL 250mL
使用手册 3150sc 1 份 1 份
运输及保存 常温运输及保存,有效期一年。
自备试剂 琼脂糖、37%甲醛、EB (10 mg/mL)、去离子甲酰胺
使用方法 一、用本产品配制琼脂糖甲醛变性胶(1.2%, 100 mL)
1. 在三角瓶中加入下列成份:
琼脂糖 1.2 g
DEPC 水 87 mL
2. 将琼脂糖加热融化后,加入 10 mL 本产品。
3. 待胶冷却至 60?C 左右,再加下列成份:
37%甲醛 3.0 mL
EB (10 mg/mL) 2-4 ?L
4. 混匀后倒胶, 凝固半小时后即可以使用琼脂糖甲醛变性胶(需要量
RNA 变性上样液和 RNA 电泳液)。
二、用本产品配制 RNA 变性上样液(以一个 RNA 样品为例)
本产品 2.0 ?L
37%甲醛 3.5 ?L
去离子甲酰胺10.0 ?L
RNA 样品 4.5 ?l于 85?变性 10 min,冰浴冷却 5 分钟后加 RNA 变性上样液后直接上样。
三、用本产品配制 RNA 电泳液
将本产品用无RNase的水稀释十倍后即可直接用于RNA的琼脂糖甲醛变性胶使用。
四、电泳条件
电泳时,将凝胶预电泳 5 min(电压为 5 V/cm)。随后加样品和分子量对照(如果有的话),以 3-4 V/cm 的电压电泳,直至溴酚蓝迁移至胶下游的 3/4 处。电泳结束后,在紫外灯下拍照。
【注意事项】
每一泳道至多可分析 30 ?g RNA,通常用 10-20 ?g 总 RNA 进行Northern杂交,可以检测高丰度 mRNA(占mRNA总量的 0.1%以上);如待测 RNA 含量极微,每个泳道需加 0.5-3.0 ?g poly(A)+ RNA。溴酚蓝泳动速度相当于 300bp DNA,二甲苯青 FF 泳动速度相当于 4Kp DNA。