产品详情
即用型热启动PCR试剂盒
产品及特点 本产品是预混的含有优化浓度的高纯度 HotStart Taq DNA 聚合酶,dNTPs,Mg2+,反应缓冲液和稳定剂等成分的即用型 2 倍浓度的 PCR 溶液。该产品使用方便,扩增性能强,特异性好,适合大规模基因检测、多重 PCR、半定量 PCR 实验和微量 DNA 模板的检测。PCR 产物 3' 端附有一个突出的“A”碱基,纯化后可直接用于 T 载体克隆。将本产品提供的专用染料添加至 PCR 反应体系中,在 PCR 反应完成后,不需添加上样缓冲液即可直接进行电泳,也可经过纯化处理,以用于酶切、连接、荧光测序等后续操作。本产品具有下列特点:
1. 高特异性,抗体型热启动,确保高效的常温抑制效果。
2. 性能稳定,实测 4℃三个月或室温(25℃)一周后扩增性能无显著变化。
3. 操作方便,用户只需准备模板和引物既可以进行 PCR 实验, 室温下配制反应体系,热循环仪无需预热。
4. 快捷,操作步骤已经限度地简化,能减少污染,降低实验误差。
5. 产物可直接用于 T 载体克隆,不需要额外的加 A 反应。
运输及保存 低温运输,-20℃保存,有效期一年。
自备试剂 DNA 模板、引物、超纯水
使用方法 使用举例:
以 30 μL 的标准 PCR 反应体系为例:在一干净的 PCR 管中,加入下列成分:
Hotstart PCR Mix 15 μL
DNA 模板(自备)
哺乳动物基因组 DNA 0.5-1 μg
酵母基因组 DNA 5-500 ng
细菌基因组 DNA 0.5-50 ng
质粒 DNA 5-500 pg
PCR 回收片段 1-100 pg
PCR 引物(自备) 10 pmol each
补水到 30 μL
放入 PCR 仪中,根据用户确定的参数进行 PCR,扩增结束后取 5-10 μL 上样电泳。注:用户可按照每 1.5 mL Hotstart PCR Mix 中加入 60 μL 专用染料的比例将 60 μL 专用染料加入到 1.5 mL PCR MagicMix 3.0 中,本染料对 PCR扩增效率没有任何影响。扩增结束后,可直接取 PCR 反应液上样电泳,不需要额外再加 DNA 上样液。
注意:
1.如果反应体系不是 30 μL,各成分需要等按比例增加或减少。
2.如果 DNA 模板中有 PCR 不明抑制物(植物、土壤和血液等 DNA 样品常含此类抑制物),可以在 PCR 体系中加入 1/10 的 PCR 抑制物清除剂(CAT#:60804,30 μL 体系中加 3 μL),可能会对 PCR 有帮助。