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冻干Fast RNA TaqMan PCR Reagent
冻干Fast RNA TaqMan PCR Reagent是以RNA为模板采用TaqMan探针法进行Real-Time PCR的专用试剂,适合于FAM/HEX/TET/ JOE/ROX等双标记探针(本品也适用于Molecular Beacon探针),其中冻干的TaqMan PCR Reagent将热启动Fast Taq DNA聚合酶、耐热反转录酶、dNTP等做成冻干品试剂,制品性能稳定,可长期保存。当加入2×TaqMan Buffer溶解后,试剂成为常规One-Step RNA TaqMan PCR单组分预混试剂,进行实验时,PCR反应液的配制十分方便简单,只需加入引物、探针、RNA模板、水即可。该制品不含有ROX校正染料,适用于适合于各种荧光标记探针,并且适用于各种定量PCR机型。 该冻干Fast RNA TaqMan PCR Reagent中的耐热反转录酶具有卓越的热稳定性,在55℃条件下仍然保留90%以上的聚合活性。制品中的Fast Taq DNA聚合酶采用专有的热启动技术确保55℃以下没有任何活性,因此可在室温建立反应体系。Fast Taq DNA聚合酶具有卓越的扩增速度,因此满足快速PCR程序,通常在30min以内可以完成扩增反应。同时该聚合酶具有耐受杂质的能力,同样适用于粗制核酸样本的扩增反应。 | ||
组分 | ||
名称200T×20μlLyophilized Fast RNA TaqMan PCR Reagent2 瓶2×TaqMan PCR Buffer51ml×2 | ||
主要特征 | ||
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应用 | ||
RNA的相对定量检测。 | ||
注意事项 | ||
储存 | ||
1. Lyophilized Fast RNA TaqMan PCR Reagent为干粉形态,每瓶可用于100次的扩增反应。 2. Lyophilized Fast RNA TaqMan PCR Reagent为干粉形态,可置于室温保存12个月,-20℃长期保存,并可采用室温运输。 3. 冻干制品经2×TaqMan PCR Buffer5溶解后,可于-20℃长期保存。 | ||
反应实例 | ||
实例 | ||
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Fig. 以A549细胞RNA为模板,将该模板100 ng/μl进行8个2倍稀释,即模板分别为:50 ng/μl、25 ng/μl、12.5 ng/μl、6.25 ng/μl、3.12 ng/μl、1.5 ng/μl、 0.75 ng/μl、0.38 ng/ul、0.19 ng/μl,每个反应体系加模板2 μl,用冻干Fast RNA TaqMan PCR Reagent 进行扩增检测,如图所示,A:本制品在宽广的模板量区间内具有卓越的线性关系:扩增效率 99.2%,R2 =0.9934。 B:以6.25 ng RNA为模板进行qPCR检测,共24个重复,由图可看出重复性良好。C:图A扩增所得标准曲线。 |