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一步法miRNA反转录试剂盒
| 由于miRNA(microRNA)分子序列较小，仅20nt左右，没有真核生物特有的Poly(A)尾巴结构，采用传统Oligo dT引物和随机引物很难获得从miRNA到cDNA的反转录产物。目前普遍采用的解决方案有两种：特异性反转录引物（图1A所示）、两步加A法反转录方案（图1B所示）。 联迈生物公司开发出一套全新的一步法miRNA反转录试剂盒，基于Peter改良的miR-Q技术，可以对成熟的miRNA同时完成Poly(A)反应和反转录反应，直接获得含有特异性tag和15(T)的cDNA产物（如图2所示）。该方法使得miRNA反转录与mRNA的反转录一样轻松,直接将提取的microRNA与反应缓冲液混合物混合并置于PCR仪上1小时即可获得高浓度的、包含所有miRNA分子的cDNA产物,获得的cDNA产物适合于采用SYBR Green染料法进行RealTime PCR进行定量检测。 | ||
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组分 | ||
| 组分名称数量4XOne step miRNA RT Solution125 μl/500 μl10×miRNA RT Primer50 μl/200 μlRNase Free H2O1 ml/1 ml×2注：如4XOne step miRNA RT Solution出现沉淀属正常现象，可用手捂化，混合均匀后使用不影响实验结果。 | ||
| 一步法microRNA反转录原理 | ||
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储存 | ||
| 请置于-20°C，可保存2年；避免反复冻融。 |
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