pEZ Blunt Zero平端克隆载体
参考价： ￥ 700
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上海联迈生物工程有限公司
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产品详情

pEZ Blunt Zero平端克隆载体

pEZ Blunt Zero平端克隆载体采用了TOPO酶连接技术，载体预先偶联上TOPO酶，当加入PCR扩增产物后迅速完成连接反应，该载体通过自杀基因表达与否筛选阳性克隆，连接阳性率高，自连背景接近于零。适用于高保真DNA聚合酶扩增后的平端PCR产物连接，载体含有氨苄青霉素和卡那霉素抗性筛选标记。



优势

  • 快速连接，最快仅需5min；

  • 操作简单，仅需加入载体和片段即可；

  • 阳性率高；

  • T3 Promoter和T7 Promoter用于体外转录。

  • 注意：引物不能磷酸化；PCR产物为使用高保真聚合酶进行扩增所得。





组分





组分名称D2301A（20T）D2301B (60T)pEZ Blunt Zero Vector(20ng/μl)10μl30μlM13F(-47) (10μM)100μl300μlM13R(-47) (10μM)100μl300μl灭菌水1ml1ml



储存





-20℃可保存1年，-80℃可保存5年，避免反复冻融。



图谱





平端克隆载体图谱



测序引物





正向测序引物：M13F(-47): 5’- CGCCAGGGTTTTCCCAGTCACGAC-3’；
反向测序引物：M13R(-48): 5’- AGCGGATAACAATTTCACACAGGA-3’；



实例





平端克隆载体



应用pEZ Blunt Zero平端克隆载体连接长度为519bp的PCR产物，挑40个菌进行菌检，阳性率为97.5%(39/40)。