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DNA/RNA热稳定连接酶
| 5’App DNA/RNA热稳定连接酶来自嗜热碱甲烷杆菌（Methanobacterium thermoautotrophicum），是RNA连接酶催化亚基的赖氨酸点突变体。该热稳定DNA/RNA连接酶催化的连接反应不依赖于ATP，但需要5’预腺苷化的接头才能将其连接到RNA或单链DNA 的3’OH末端。该酶也可催化3’端被2’-O-甲基化的RNA和5’预腺苷化接头的连接反应。连接反应的最适反应温度为 60-65℃。即使在ATP存在的情况下，该连接酶也不能使RNA或单链DNA的5’端磷酸发生腺苷化，因此降低非特异性的串联和环化。该酶为热稳定型，佳反应温度为 65℃，此温度下降低了RNA的二级结构，大大提高连接效率。 |  |
组分 | |
| 组分名称数量Thermostable 5’AppDNA/RNA Ligase (20pmol/μl)20μl10×App DNA/RNA Ligase Buffer100μl50 mM MnCl2100μl | |
应用 | |
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储存 | |
| -20℃可保存3年。 | |
使用注意事项 | |
| 1. 1× AppDNA/RNA Ligase Buffer：10mM Bis-Tris-Propane- HCl pH 7.0,10mM MgCl2,1mM DTT。 2. 该酶只能连接5’-端预腺苷化的Oligo接头到单链DNA或RNA的3’-OH基团 3. 当腺苷化底物的5’-端一个碱基为“C”时，连接效率较差。 | |
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