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Benzonase核酸酶残留检测试剂盒
Benzonase可高效降解任何形式的核酸, 广泛用于蛋白等生物制品中核酸的去除。在处理过的生物制品中,可能存在微量Benzonase残留,这些微量残留会对后续生物制品的应用造成一定的影响。生物制品中Benzonase的残留量是衡量生物制品质量的重要指标之一。目前,Benzonase核酸酶残留检测多基于免疫吸附ELISA的检测方法, 由于其方法自身的限制,测量并不准确,主要体现在以下方面:(1)检测抗体的亲和性能差异大,受环境影响大;(2)检测抗体的非特异性交叉反应;(3)生物制品本身蛋白浓度差异,造成的亲和吸附差异。 联迈生物全新研发的基于荧光探针的Benzonase核酸酶残留检测方案,成功避开以上缺点,实现了高重复性、高准确度、高灵敏度检测。在无Benzonase核酸酶的样品中,该探针是稳定存在的,不会产生荧光信号;含有核酸酶残留的样品中,核酸酶可将荧光标记的DNA探针切割,从而产生逐渐增强的荧光信号。该方法可检测1.5~50ng/ml的核酸酶残留,操作简单,只需加入Benz Detection Solution和待检样品,在定量PCR仪上15min内即高准确度完成检测。 | |
组份 | |
名称50T2×Benz Detection Solution1 ml标准品A(25 ng/ml)100 μl标准品B(12.5 ng/ml)100 μl标准品C(6.3 ng/ml)100 μl标准品D(3.1 ng/ml)100 μl标准品E(1.5 ng/ml)100 μl样品稀释液1.5 ml | |
应用 | |
重组蛋白或其它生物制品中的核酸酶残留检测。 | |
特别注意事项 | |
该制品限于联迈生物生产的Benzonase核酸酶(C2001-C2004),其它供应商生产的制品,可能不适用,无法提供数据支持。 | |
储存 | |
置于-20°C,可保存6个月,-80°C可保存18个月。 | |
实例 | |
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按说明书进行反应后收集数据,通常可读取5min(Ct10)~10min(Ct30)之内的数值;采用Excel进行标准曲线制作,采用幂函数,X轴为荧光信号值,Y轴为标准品浓度。再根据标准曲线中的计算公式,将检测样品的荧光值(x轴)换算成Benzonase核酸酶残留量(ng/ml,y轴)。 | |
数据处理中的注意事项 | |
1. 通常样本中Benzonase核酸酶残留量低于标准品F(1.5ng/ml)时,无法检出。报告形式为Benzonase核酸酶残留量<1.5ng/ml。 2. 检测样品稀释后产物的荧光值仍然高于标准品A(25ng/ml)的荧光信号值,则需要将样本继续稀释后再进行检测。 3. 不同的荧光PCR机型,可能在数据表现形式上存在差异,但原则不变,原理为短时间内的荧光增加量代表Benzonase核酸酶含量。 |