核酸外切酶I(Exonuclease I, E.coli)
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核酸外切酶I(Exonuclease I, E.coli)

核酸外切酶I(Exonuclease I)具有从3’-5’方向降解单链 DNA 的外切酶活性，能够逐步释放脱氧核糖核酸5'单磷酸，并留下完整的5'端二核苷酸。该酶来源于携带有E. coli exo I 基因的质粒，经重组表达纯化而得。Exonuclease I多用于PCR扩增后降解消化引物，该酶对于双链DNA和磷酰或乙酰基团封闭的3’OH末端DNA链无活性。

单位定义

1 单位指在 37℃ 条件下，30 分钟内催化释放 10 nmol 的酸溶性核苷释放所需要的酶量。

组分

名称数量Exonuclease I(20 U/μl)75 μl10×ExoI Buffer1 ml

应用

  • 从PCR混合物中去除引物

  • PCR产物测序之前用于在单管中使用大引物进行的PCR诱变反应

  • 从核酸混合物中去除含有3'羟基末端的单链DNA

  • 检测含有3'羟基末端的单链DNA的存在

储存

置于-20°C，可保存3年。

使用注意事项

（1）1×ExoI Buffer：67mM Glycine-KOH pH 9.5，6.7mM MgCl2，10mM 2-巯基乙醇。该酶在常规PCR Buffer中也具有活性。
（2）该酶的佳反应温度为37°C，80°C 20min可失活。
（3）该酶不能切割双链DNA，因此含有二级结构的单链DNA需要变性后才能完全消化。