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甲酰胺嘧啶-DNA糖基化酶(Fpg)
| Fpg (formamidopyrimidine [fapy]-DNA glycosylase，甲酰胺嘧啶 [fapy]-DNA 糖基化酶）也称作 8-氧代鸟嘌呤 DNA 糖基化酶，既有 N-端糖基化酶活性也有 AP-裂解酶活性。N-端糖基化酶活性可以切下双链 DNA 上受损的嘌呤碱基，产生一个脱嘌呤（AP）位点。AP-裂解酶活性可以切割 AP 位点的 3′ 或 5′ 端，因此可以除去 AP 位点，产生一个具有 3′ 和 5′ 磷酸的碱基缺口。被 Fpg 识别并切除的受损碱基包括：7,8-二羟基-8-氧代鸟嘌呤（8-氧代鸟嘌呤）、8-羟基腺嘌呤、fapy-鸟嘌呤、甲基-fapy-鸟嘌呤、fapy-腺嘌呤、黄曲霉毒素 B1-fapy-鸟嘌呤、5-羟基-胞嘧啶和 5-羟基尿嘧啶。 | |
组分 | |
| 名称数量Fpg (8 U/μl)100 μl/500 μl10X Fpg Reaction Buffer1 ml/1 ml×2 | |
应用 | |
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单位定义 | |
| 1 单位指在 10 μl 反应体系中，37℃条件下， 1 小时内能够切割 1 pmol 含单个与胞嘧啶配对的 8-氧代鸟嘌呤的 34 bp 寡核苷酸双链所需要的酶量定义为一个活性单位。 | |
反应条件 | |
| 10 mM Bis-Tris（pH 7.0），10 mM MgCl2 ，1mM DTT, 100 μg/ml BSA，37℃ 温育 | |
酶储存液 | |
| 50 mM Tris-HCl (pH 8.0), 50 mM KCl, 1 mM DTT, 50% Glycerol. | |
热失活 | |
| 60°C 10min。 | |
储存 | |
| 置于-20°C可保存2年，避免反复冻融。 | |
