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Annexin V-FITC/PI凋亡检测试剂盒
细胞凋亡是细胞的基本特征之一,它在机体的胚胎发育、组织修复、内环境的稳定等方面起着十分重要的作用。 AnnexinV是一种分子量为35~36kD的Ca2+依赖性磷脂结合蛋白,能与细胞凋亡过程中翻转到膜外的磷脂酰丝氨酸(Phosphatidylserine,PS)高亲和力特异性结合。以标记了FITC的 AnnexinV作为荧光探针,利用流式细胞仪或荧光显微镜可检测细胞凋亡的发生。 Propidium iodide(PI)是一种核酸染料,它不能透过完整的细胞膜,但凋亡中晚期和死细胞由于细胞膜破裂,因此PI能够将细胞核染红。将AnnexinV与PI联合使用,可以区分活细胞(FITC/PI均为阴性)、凋亡早期 细胞(FITC阳性、PI均为阴性)、凋亡晚期或死细胞(FITC/PI均为阳性)。 本细胞凋亡检测试剂盒使用改进型的高纯度FITC染料,其在红色通道(690nm)无发射光,因此极大的减少了对红色通道的干扰。使用该试剂盒进行细胞凋亡检测时荧光相互干扰更小、检测更准确。 | ||
组分 | ||
组分名称数量(20T/100T)Annexin V-FITC100 μl/500 μlPI Staining Solution100 μl/500 μl10×Annexin V Binding Buffer20 ml | ||
应用 | ||
细胞凋亡检测 | ||
储存 | ||
2~8℃,有效期1年。 | ||
注意事项 | ||
1. 整个操作过程动作要尽量轻柔,勿用力吹打细胞,尽量在4℃下操作。 2. 反应完毕后请尽快检测,反应1 小时后荧光强度就开始衰变。 3. Annexin V-FITC 和 Propidium iodide 是光敏物质,在操作时请注意避光。 4. 试验操作过程中佩戴手套等防护用品。 5. 试验开始前将一定量的 10×Annexin V Binding Buffer 用超纯水(1:9)稀释至 1×备用。 | ||
实例 | ||
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图:将融合度90%的Hela细胞分两组,一组作为对照组正常培养,另一组向培养基中加入终浓度为500μM的H2O2处理1h,后收集细胞,用细胞凋亡检测试剂盒(联迈生物,S0185)处理后上流式细胞仪检测,用Flowjo软件分析,结果如图。注:横坐标为FITC染色,纵坐标为PI染色。 |