产品详情
对虾偷死野田村病毒(CMNV)RNA核酸检测试剂盒(恒温荧光法)使用及效果:
PCR反应特点
(1) 特异性强
PCR反应的特异性决定因素为:
①引物与模板DNA特异正确的结合;
②碱基配对原则;
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性;
④靶基因的特异性与保守性。
以下是PCR检测试剂盒的订购信息:
产品名称 | 规格 | 分类 |
对虾偷死野田村病毒(CMNV)RNA核酸检测试剂盒(恒温荧光法) | 48T | 恒温荧光法 |
产品运输:低温运输
产品保存:-20℃保存
产品有效期:一年
储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。
运输:低温、避光,快递免费送货上门。
对虾偷死野田村病毒(CMNV)RNA核酸检测试剂盒(恒温荧光法)其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性,使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行,结合的特异性大大增加,被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区,其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的生成量是以指数方式增加的,能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞;在病毒的检测中,PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位);在细菌学中zui小检出率为3个细菌。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶,一次性地将反应液加好后,即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应,一般在2~4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析,不一定要用同位素,无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或细菌及培养细胞,DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论
PCR反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物: 引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。
设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC好随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3’端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3’端的碱基,特别是zui末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点,被扩增的靶序列zui有适宜的酶切位点,这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
98%25g1g菊糖High Density Lipoprotein Apolipoprotein A1CP,98%98%25gCYP4503A
≥99%500g5g菊糖High Density Lipoprotein Serum Amyloid ACP,98%≥99%500gHAT
≥99%1g25g菊糖High Density Lipoprotein Paraoxonase 1BR,98%≥99%1gMC
95%25g5g菊糖EquolBR,98%95%25gMEK
98%5g25mlD-甘露糖胺盐酸盐ADAMTS-13BR,98%98%5gRUNX2
98%100g5mlD-甘露糖胺盐酸盐Immunoglobulin alpha Fc receptorAR,99.5%98%100gColl2-1NO2
98%10g1ml蜜二糖carboxyhemoglobinAR,99.5%98%10gFIB3-3
98%25g1g蜜二糖Phospholipid hydroperoxide glutathione peroxidase, mitochondrialAR,99.5%98%25gα7N-AChR-Ab
98%5g25g蜜二糖OrexinsAR,99.5%98%5gRNF5
98%100g5g蜜二糖low-density lipoprotein-receptor-related protein 4 antibodyCP,98%98%100g2,5-OAS
对虾偷死野田村病毒(CMNV)RNA核酸检测试剂盒(恒温荧光法)97%25g100mlELISA包被缓冲液(1×)Integrin β4BR,98%97%25gHDL3
98%5g25mlELISA包被缓冲液(10×)Integrin β5BR,98%98%5gHDL-C
98%100g1gELISA包被缓冲液(10×)Integrin β3BR,98%98%100gHMGB-1
97%25g100gELISA终止液Calpain1BR,98%97%25gT
97%500g25gELISA终止液caenorhabditis elegans death geneBR,98%97%500gGLU
97%100g25gBPTE电泳缓冲液(1×,RNase free)protectinBR,99%97%100gGluR1
97%25g5gBPTE电泳缓冲液(10×,RNase free)S100A6BR,99%97%25gGluR2
97%5g25gDNA非变性加样缓冲液(2×)MRPL41BR,99%97%5gGLDH
97%1g5gDNA凝胶加样缓冲液(6×DNA Loading Buffer)Metallothionein-2BR,98%97%1gGAD65
98%5g100gDNA凝胶加样缓冲液(6×DNA Loading Buffer)CD5 Antigen-likeBR,98%98%5gGln
组成及试剂配制:
1、酶标板:一块(96孔)
2、 标准品(冻干品): 2瓶,请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml,盖好后室温静置大约10分钟,同时反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为200 U/L,然后做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释),分别配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液:1×20ml。
4、 检测稀释液A:1×10ml。
5、 检测稀释液B:1×10ml。