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细胞培养操作规程:
人恶性非霍奇金淋巴瘤患者的自然杀伤细胞;NK-92 [NK92]价格主要功能:
(1)血管平滑肌细胞的再生能力是原发血管病变的重要因素。
(2)表达钙通道及ICAM-1和VCAM-1,参与血管壁的炎症反应。
(3)与血管疾病的进展和稳定有关。
生理变化:
(1)主动脉硬化。
(2)主动脉瘤
(3)主动脉钙化。
一般培养方法:
1、组织块培养法
A)按照前述方法取材,将组织剪成或切成1mm3大小的小块,并加入少许培养基使组织湿润。
B)将小块均匀涂布于瓶壁,每小块间距0.2 cm~12.5px,一般在25mL培养瓶(底面积为437.5px2)可接种20~30小块为宜,小块放置后,轻轻翻转培养瓶,使瓶底朝上,然后于瓶内加入适量培养基盖好瓶塞,将瓶倾斜放置在37℃温箱内。
C)培养2~4小时,待小块贴附后,将培养瓶缓慢翻转平放,静置培养,动作要轻,严禁摇动和来回振荡,以防由于冲动而使小块漂起而造成培养失败,若组织块 不易贴壁可预先在瓶壁涂一薄层血清、胎汁或鼠尾胶原等。开始培养时培养基不宜多,以保持组织块湿润即可,培养24小时后再补液,培养初期移动和观察时要轻 拿轻放,开始几天尽量不去搬动,以利贴壁和生长,培养3~5天时可换液,一方面补充营养,一方面去除代谢产物和漂浮小块所产生的毒性作用。
2、消化培养法
该方法是采用前述的消化分散法,将妨碍细胞生长的细胞间质(包括基质、纤维等)去除,使细胞分散形成细胞悬液,然后分瓶培养。
3、悬浮细胞培养法
对于悬浮生长的细胞,如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化,可采用低速离心分离,直接培养,或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。
细胞名称 人恶性非霍奇金淋巴瘤患者的自然杀伤细胞;NK-92 [NK92]
形态特性 淋巴母细胞
生长特性 悬浮生长
特征特性 NK-92是从一位患有急进性非霍奇金淋巴瘤的50岁白人男性外周血单核细胞衍生来的一株白细胞介素-2依赖型NK细胞株。 这株细胞对很多恶性细胞有细胞毒性;铬释放试验显示它能杀死K562和Daudi细胞。 NK-92细胞(经过照射以防止增殖)可以有效地用于血液中白血病的体外免疫清扫而不危及血细胞的功能。 NK-92细胞有以下特征: CD2, CD7, CD11a, CD28, CD45, CD54表面标记阳性,CD56亮;CD1, CD3, CD4, CD5, CD8, CD10, CD14, CD16, C
培养条件 α-MEM:Alpha Minimum Essential Medium (with Nucleosides) 优质胎牛血清,10%
传代方法 1:2。3天内可长满。
传代情况 PN5
冻存条件 完全培养基+8%DMSO
产品名称 | 人恶性非霍奇金淋巴瘤患者的自然杀伤细胞;NK-92 [NK92]价格 |
生长特性 | 贴壁生长 |
货号 | CS-X6354 |
人恶性非霍奇金淋巴瘤患者的自然杀伤细胞;NK-92 [NK92]价格运输保存:采用干冰保存运输。收到细胞时,若干冰已经完全融化,请立即将细胞复苏培养;
若尚留有干冰,请立即将细胞放入液氮中保存待用,请按指定条件贮存细胞,切不可将细胞置于高温环境。培养操作:
1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。
3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类;
1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。
2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。
3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取
Chromogranin C/Sg II 英文名称: 嗜铬粒蛋白C抗体 0.2ml
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PKB (Rat) 大鼠蛋白激酶BMulti-class antibodies规格: 48T
Anti-Phospho-EGFR(Thr669) 磷酸化表皮生长因子受体抗体Multi-class antibodies规格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh MyoGEF 肌球蛋白相互作用G蛋白交换因子抗体 规格 0.2ml
Ig-j(Human immunoglubin joining chain) ELISA Kit 人免疫球蛋白j链 96T
SPOP 英文名称: SPOP蛋白抗体 0.2ml
人恶性非霍奇金淋巴瘤患者的自然杀伤细胞;NK-92 [NK92]价格Rhesus antibody Rh phospho-MEF2D(Ser180) 磷酸化肌细胞特异性增强因子2D抗体 规格 0.1ml
AQP1(Aquaporin1) 水通道蛋白-1抗原Multi-class antibodies规格: 0.5mg
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