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产品描述: 产品名称:GelRed核酸染料 描述: GelRed核酸染料特点:
1.
无毒性:GelRed独特的油性和大分子量特点使其不能穿透细胞膜进入细胞内,艾姆斯氏试验结果也表明,该染料的诱变性远小于EB。
2.
灵敏度高:适用于各种大小片段的电泳染色,对核酸迁移的影响小于SYBR Green I。
3.
稳定性高:适用于使用微波或其他加热方法制备琼脂糖凝胶;室温下在酸或碱缓冲液中极其稳定,耐光性强。
4.
信噪比高:样品荧光信号强,背景信号低。
5.
操作简单:与EB一样,在预制胶和电泳过程中染料不降解;而电泳后染色过程也只需30min且无需脱色或冲洗,即可直接用紫外凝胶透射仪观察。
6.
适用范围广:可选择电泳前染色(胶染法)或电泳后染色(泡染法);适用于琼脂糖凝胶或聚丙烯酰胺凝胶电泳;可用于dsDNA,ssDNA或RNA染色。
7.
与EB有相同的光谱特性,无需改变滤光片及观察位置:标准的EB滤光片或SYBR滤光片都适用,使用与观察EB相同的普通紫外凝胶透射仪观察即可,在300nm紫外光附近可得到最佳激发。但是GelRed不能被488nm氩离子激光器或相似波长的可见光完全激光,因此不推荐使用此类激发装置的成像系统。对于此类装置,我们推荐您使用Supergreen,它和SYBR Green I的光谱相似,灵敏度相当,但更加稳定。
使用方法:
1.
胶染法(用法同EB)(推荐方法)
a.
制胶时加入GelRed核酸染料(例如:每50ml琼脂糖溶液中加入5ul GelRed 10000*储存液,以此类推)。
b.
按照常规方法进行电泳。
注意事项:
此方法染色染料用量相对较少。500ul大约可以做100块500ml胶。
由于GelRed具有良好的热稳定性,可以在热的琼脂糖溶液中直接添加,而不需要等待溶液冷却。摇晃,振荡或者翻转以保证染料充分混匀。也可以选择将GelRed储液加到琼脂糖粉末和电泳缓冲液中,然后加微波炉或者其常用方式加热以制备琼脂糖凝胶GelRed兼容所有常用的电泳缓冲液。
如果总是看到条带弥散或分离不理想,建议使用泡染法染色以确认问题是否与染料有关。如果染色后问题依然存在,则说明问题与染料无光,请尝试:降低琼脂糖浓度,选用更长的凝胶;延长凝胶时间以保证边缘清晰;改进上样技巧或选择泡染法染色。
此方法不适合预制聚丙烯酰胺凝胶,对于聚丙烯酰胺凝胶请使用泡染法。
2.
泡染法
a.
按照常规方法进行电泳
b.
用水讲GelRed核酸染料(10000*H2O)储液稀释约3300倍到0.1M Nacl中,制成3*染色液(例如将15ul GelRed核酸染料(10000*H2O)储液和5ml 1M Nacl加到45ml H2O中)
c.
将凝胶小心低放入合适的容器中,如聚丙烯容器中。缓慢加入足量3*染色液浸没凝胶。室温振荡染色30min左右,最佳染色时间根据凝胶厚度以及琼脂糖浓度不同而略有不同。对于含3.5%~10%丙烯酰胺的凝胶,染色时间通常介于30min到1h,并随丙烯酰胺含量增加而延长。
注意事项:
用泡染法染色时,染料用量较多。单次使用的染色液可重复使用3次左右
3*GelRed染色液可以大量制备,在室温下避光保存直至用完。
特别提醒:
如果您使用的是紫外成像仪,请选择GelRed;如果您使用激光成像仪或希望在可见光下观测,请选择supergreen。
在极少数情况下,质粒经某些酶切后的DNA样品会出现拖尾和分辨率降低,此时建议同时尝试两种染色方法以决定哪种方法更加合适。
保存:-20℃避光,有效期:1年。
储存/保存方法: 4℃避光,有效期:1年。
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