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产品描述: 产品名称:WB solution base kit(rabbit) 储存/保存方法: 2-8度保存,有效期6个月。 产品组分:
操作步骤: 1) 取准备好的蛋白裂解液,和2*上样缓冲液等体积混合,混匀后于100度煮10min,12000rpm离心5min,取适量体积上样。 2) 电泳:使用配制好的电泳液,90V电泳20min,120V电泳至结束。 3) 转膜:使用配制好的电转液,100V恒压电转90min。 4) 封闭:用1*TBST配制5%的脱脂奶粉/BSA溶液,将膜置于5%的脱脂奶粉/BSA溶液中,室温摇床上孵育60min。 5) 孵育一抗,孵育条件为2-8度摇床上孵育过夜。 6) 洗涤,用1*TBST洗3次,每次10min。 7) 孵育二抗,孵育条件为室温摇床上孵育60min。 8) 洗涤,用1*TBST洗3次,每次10min。 9) 显色和曝光,取显色A液和B液等体积混合,将混合后的液体铺满整张膜,反应2min,之后即可进行曝光操作。 操作说明: 溶液配制 电泳液:取10*电泳液100ml,加入纯化水,定容至1000ml。 电转液:取10*电转液100ml,加入800ml纯化水和100ml无水甲醇。 1*TBST:取10*TBST溶液100ml,加入纯化水,定容至1000ml。
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