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病毒保存液(非灭活型)不含裂解盐,但是保存的病毒完整性更好,检出率更高,除了核酸检测外还可以用于其他研究。非灭活的病毒保存液,具有抗细菌和抗真菌的作用;牛血清白蛋白(BSA)作为蛋白质稳定剂,可在病毒的蛋白质外壳形成一种保护膜,使其不易分解,保证病毒的完整性;Hanks缓冲液构建的中性环境,有助于增加病毒的生存时间和感染稳定性。非灭活的病毒保存液通常用于临床流感、禽流感(如H7N9) 、手足口病、麻疹等病毒标本及支原体、脲原体、衣原体等标本的采集及运送。
一、病毒的特征:病毒是一类个体微小,无完整细胞结构,含单一核酸(DNA或RNA)型来,必须在活细胞内寄生并复制的非细胞型微生物。
1.含有单一知种核酸(DNA或RNA)的基因组和蛋白质外壳,没有细胞道结构,个体微小、结构简单。
2.在感染细胞的同时或稍后释放其核酸,然后以核酸复制的方式增殖,而不是以二分裂方式增殖;
3.严格的细胞内寄生性。病毒自身不能复制,而是将基因侵入宿主细胞内,借助后者的复制系统复制新的病毒。
二、非灭活型病毒保存液特点:
1.低温非冻型保存,不破坏病毒的外壳,方便长途运输。
2.适用于各种拭子样品,包括口腔拭子、鼻腔拭子、咽喉拭子、等
3.可以用于H1N1流感病毒和其他任何可以用拭子取样的病毒。
4.可以用柱式病毒DNAout或柱式病毒RNAout提取病毒核酸。
5.采样液中的抗生素能有效防止细菌和真菌污染。
6.采样液添加了牛血清白蛋白,能保护病毒样本,提高分离率。
病毒保存液(非灭活型)成分:
1.保存液成分为:Hanks液基础,庆大霉素,真菌抗生素,BSA(V),冷冻保护剂、生物缓冲剂及氨基酸等。
2.多种抗生素联合,具有抗细菌和抗真菌的作用。
3.牛血清白蛋白(BSA)作为蛋白质稳定剂,可在病毒的蛋白质外壳形成一种保护膜,使其不易分解,保证病毒的完整性。
4.Hanks缓冲液构建的中性环境,有助于增加病毒的生存时间和感染稳定性。
5.用于临床流感、禽流感(如H7N9)、手足口病、麻疹等病毒标本及支原体、脲原体、衣原体等标本的采集及运送。
四、使用方法:
注意:标本采集人员需按有关规定做好个人防护。咽、鼻拭子最好在发病的头3天采集。
1.在安全柜内本产品分装到自备的、螺旋盖内有橡胶圈的5mL旋盖塑料管里(一级容器)。B型产品已经在旋盖离心管中,可以跳过此步。
2.鼻拭子的采集:将棉签轻轻插入鼻道内鼻腭处,停留片刻后缓慢转动退出。以同一拭子拭两侧鼻孔。将棉签浸入上步得到的、装有3mL本产品的旋盖离心管中,弃去拭子尾部,拧紧螺旋盖。
3.咽拭子的采集:用棉签擦拭双侧咽扁桃体及咽后壁,将棉签浸入第一步得到的、装有3mL本产品的旋盖离心管中,弃去拭子尾部,拧紧螺旋盖。
4.直接在一级容器上用油性记号笔写明样本的种类、采样时间、编号、患者姓名。
5.将密闭后的标本放入大小适合的塑料袋内密封;每袋装一份标本。同时也将标本有关信息填在标本送检表上,连同一级容器封于塑料袋内。
6.将装标本的密封袋放入自备的带螺旋盖内有橡胶圈的塑料容器(二级容器内,拧紧盖,在容器上标明有关信息。同一患者2份以上的密封标本,可以放在同一个二级容器内二级容器要承受不少于95KPa的压力,内衬具吸水和缓冲能力的物质。所有容器必须印有生物危险标注。
7.将二级容器摆放在专用运输箱内(或疫苗运输箱),放入冰排,然后以柔软物质填充,并密封,由专人(2人)运送,不得邮寄,最好使用专车。8.采集的标本若不能在24小时内送达,则应尽快在-70℃以下保存。无-70℃条件的需在4℃冰箱短时间暂存,并尽快联系递送标本。流感病毒在-20℃~-40℃时不稳定,故长期保存最好在-70℃温度以下进行。
低温运输及保存,-20°,有效期一年。