产品详情
QD625标记的家兔抗鼠-lgG Fc特异性抗体
英文名称:Quantum Dot 625-Rabbit Anti-Mouse(Fc specific) IgG
【保存条件】 2-8℃保存,量子点不可冻存。建议活化试剂可在-20℃长期保存。
【原理】
基于 Super-dendron(超枝化)量子点表面配体修饰专利技术,配合预置试剂,操作简便,可实
现抗体快捷、共价、高效标记。本系列量子点具有独特的生物相容性、无非特异性吸附,标记产物可用于侧向流层析、免疫组化、免疫荧光、蛋白印记、分子示踪等试验。
【标记所需仪器与试剂】
2~10μl、5~50μl、20~200μl、100~1000μl 或相似量程的可调高精度移液器及相应吸头(无蛋白酶、RNA 酶等污染)、离心机、涡旋振荡器、反应管、去离子水、待标记抗体溶液、手套、护目镜、口罩、实验服等防护用品。
【实验前准备及注意事项】
1. 请检查自配仪器、试剂是否齐全,试剂盒组分是否完整;
2. 试剂检查:在 350~450nm 紫外或蓝光光源照射下量子点应为发荧光的均质溶液,活化试剂和 10×反应液均为无色透明液体(室温)。使用前通过低速离心收集试剂于管底,避免开盖溅洒损
失。
3. 待标记抗体样品可以是冻干粉状态或保存在磷酸钠缓冲溶液(PB/PBS pH7~8)中,配置后初始浓度应大于 2mg/ml,最低不低于 1mg/ml。保存液中含有保护性蛋白或其它杂质可能会影响标记效率,建议使用高纯度样品或自行进行纯化;若样品中组分不明,请先进行预实验,确定达
到预期连接效果后再进行大批量标记。
4. 活化试剂在水溶液中不稳定,若需用缓冲液稀释,建议临用前现配。需要稀释存储时,应使用
无水二甲亚砜(DMSO),并置于-20℃保存。
5. 用去离子水稀释 10×反应液至 1×反应工作液,1×反应工作液用于量子点和抗体的稀释。
【操作步骤】
1. 用 10×反应液和去离子水稀释待标记抗体浓度至 1-10mg/ml 范围内,缓冲体系为 1×反应工作液;备注:抗体分子量约为 150KDa,通过质量浓度(mg/ml)可换算抗体摩尔浓度,公式:抗体质量浓度(mg/ml)÷150 (KDa) =摩尔浓度(mM);
2. 按活化试剂:抗体=20:1 的摩尔比(按抗体摩尔浓度或参照以下抗体活化交联配比表),将活化试剂加入到步骤 1 中稀释好的抗体溶液中,混匀,室温孵育 30 分钟;
3. 按抗体:量子点=2:1 的摩尔比,将量子点溶液加入到步骤 2 的反应混合液中,混匀,室温孵育
30 分钟,标记完成。
4. 选做:将封闭试剂加入到步骤 3 的反应混合液中,室温孵育 30 分钟,封闭完成,即可用于后
续试验。
备注:①本操作说明只供参考,建议反应终体系中量子点浓度不得小于 1μM;②客户可按产品
要求优化调整抗体与量子点比例;③反应过程中所使用的工作液均为 1×工作反应液。
特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!