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预染配胶液,20×(通用型)
10×TBE Buffer
TBE Buffer全名为Tris-Borate-EDTA buffer。它主要用于DNA的琼脂糖电泳和DNA和RNA的PAGE电泳。跟TAE相比,其特点是含硼酸,可能会影响连接等后续酶反应。硅胶模回收时,回收率比TAE低。缓冲能力强于TAE,可反复使用几次。PAGE电泳最使用1×,琼脂糖电泳可以使用0.5×。线性双链DNA的泳动速度慢于TAE。最不要使用含甘油的上样品液,因为甘油可使硼酸多次解离,改变pH。
RNA提取法:试剂中的主要成分为异硫氰酸胍和苯酚,其中异硫氰酸胍可裂解细胞,促使核蛋白体的解离,使RNA与蛋白质分离,并将RNA释放到溶液中。当加入氯时,它可抽提酸性的苯酚,而酸性苯酚可促使RNA进入水相,TBE电泳液,10× 离心后可形成水相层和有机层,这样RNA与仍留在有机相中的蛋白质和DNA分离开。水相层(无色)主要为RNA,有机层(黄色)主要为DNA和蛋白质。
实验步骤:
1、RNA的提取;
2、反转录合成cDNA;
3、PCR扩增;
4、产物的电泳和结果的测定。
RT-PCR是将RNA的反转录(RT)和cDNA的聚合酶链式扩增(PCR)相结合的技术。首先经反转录酶的作用从RNA合成 cDNA,再以cDNA为模板,扩增合成目的片段。RT-PCR可以一步法或两步法的形式进行。在两步法RT-PCR中,每一步都在zui条件下进行。
TBE Buffer全名为Tris-Borate-EDTA buffer。它主要用于DNA的琼脂糖电泳和DNA和RNA的PAGE电泳。跟TAE相比,其特点是含硼酸,可能会影响连接等后续酶反应。硅胶模回收时,回收率比TAE低。缓冲能力强于TAE,可反复使用几次。PAGE电泳最好使用1×,琼脂糖电泳可以使用0.5×。线性双链DNA的泳动速度慢于TAE。最好不要使用含甘油的上样品液,因为甘油可使硼酸多次解离,改变pH。
储存条件:常温运输及保存、有效期一年。长时间放置可能会出现沉淀。
特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
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