产品详情
cDNA第二链合成试剂盒
Second Strand cDNA Synthesis Kit
cDNA第二链合成的原理是用RNase H使RNA-DNA杂合链中的RNA产生切口,再用DNA Polymerase I通过切口平移(nick translation)反应进行RNA链取代合成cDNA第二链。
产品特点:
1. 即开即用,含有合成cDNA第二链的所有试剂。
2. 所得双链cDNA可以直接用于后续的常规PCR、real-time PCR、cDNA文库构建、抑制性差减杂交等。
试剂盒组成:
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
使用方法:
一、合成cDNA第一条链
本试剂盒不提供cDNA第一链合成试剂,用户需自备相关试剂合成cDNA第一链。
二、合成cDNA第二链
1.在冰浴上向已经完成合成cDNA第一条链的反应体系中依次加入下表试剂:
注:如果不需要将双链cDNA平末端化,则可以跳过T4 DNA聚合酶处理步骤。
2.电泳5μl检测cDNA质量。如果cDNA在0.5-10Kb的范围内呈模糊一片,则cDNA合格。如果没看见cDNA或有其他异常,需查找原因后再继续。
3. 所得cDNA可以直接用于后续的常规PCR、real-time PCR、cDNA文库构建、抑制性差减杂交等实验。
特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!