产品详情
一管式反转录试剂盒(RT MIX)
One-tube RT Kit
本产品是一管式反转录预混Mix,内含反转录第一链合成所需的所有试剂(MMLV、Random primers、Oligo dT Primer、dNTP Mixture、反应Buffer等),用户只需加入模板RNA和RNase-Free水即可进行反应。
产品特点:
1.cDNA的合成更加方便,用户只需准备模板和水即可进行反应。
2.快捷,操作步骤已经最大限度地简化,能减少污染,降低实验误差。
3.效率高,特殊优化的oligo dT和N6随机引物配比,反转录效率高。
4.速度快,只需42℃,20分钟即可完成cDNA第一链的合成。
5.能够用于GC含量高,二级结构复杂的RNA模板,合成cDNA片段长度可达12kb。
6.兼容性好,合成的cDNA可直接用于荧光定量PCR反应,灵敏度高、稳定性好。
试剂盒组成:
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
使用方法:
1.解冻后颠倒轻弹混匀各组分,以20μL体系为例,按下表加入(2×RT Master Mix很粘稠,取用前请短暂离心,并避免吸头外壁沾附损失):
?注意:对于二级结构很复杂的RNA模板,推荐使用变性步骤,即在操作步骤之前,将模板RNA在65℃孵育5分钟后迅速转移到冰上,再进行下一步操作。
2.轻轻混匀,42℃孵育20分钟进行反转录反应。
?注意:对亍二级结构复杂或者GC含量高的模板,可以提高温度至50℃,以增强反转录效率。
3.85℃加热5秒钟灭活反转录酶置冰上备用(更长时间保存请置于-20℃)。
注意事项:
1.实验过程中请注意避免RNase污染,防止RNA降解或实验中的交叉污染。
2.使用之前请完全溶解并充分混匀,以防因盐离子浓度丌均影响实验结果。
3.使用后应尽快放回-20℃,避免反复冻融。
4.RNA模板的完整性对cDNA合成效率起着决定性作用,因此请选择可靠的RNA提取/纯化方法。
5.如果扩增片段较长或者RNA结构复杂,为了加强转录效果,可以将RNA单独置于65-70℃加热5-10分钟后再加入体系。
6.操作人员请带口罩和一次性手套,并经常更换手套。
特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!