产品详情
蛋白胶微量回收试剂盒
Protein Gel Mini-Extraction Kit
十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)不仅可用于检测蛋白质的相对分子质量,而且也是分离纯化蛋白质的重要工具之一,随着蛋白质技术的微量化,有必要从凝胶中回收蛋白质以用于制备抗体、免疫印迹、氨基酸组分分析或末端序列测定等。
产品特点:
1.简单,不需要复杂而昂贵的仪器(如电洗脱仪)。
2.适用于变性胶(SDS-PAGE)和非变性胶。
3.回收率一般在50-90%之间(跟蛋白质大小,洗脱时间相关)。
4.跟后续的实验兼容,包括2-D电泳、质谱测序等。
产品组成:
储存条件:常温运输,4℃保存(微型离心管专用研磨杵可以室温保存),有效期一年。
使用方法:
1.按常规方法进行变性(SDS-PAGE)或非变性蛋白电泳。
2.切取含目的蛋白的胶(尽可能地把多余的胶切除,否则会影响回收效率)。
?注意:固定和染色后蛋白回收效果很差,所以建议把样品分多孔上样,电泳后只切其中一个样孔的胶条进行固定和染色,然后将此胶条放回到在整体胶中原来的位置,通过显色胶条上的蛋白条带找到在未染色胶上对应区域,并切下此区域的胶进行回收。
3.将切下的胶块转移到1.5mL塑料离心管中。
4.用研磨杵充分将胶块压磨成尽可能细小的碎片。
5.加入20μL溶液A,4℃摇晃洗脱至少2-16小时(过夜)。此时最好将溶液B放在冰箱预冷。
6.10000g离心10分钟,转移上清到新的离心管中,注意不要吸取碎胶。
7.加入5倍体积的预冷的溶液B,摇晃混匀。
8.-20℃放置至少10-30分钟。
9.室温12000g离心5-20分钟,弃上清。
10.室温充分晾干,得到的沉淀即为回收的蛋白质。回收的蛋白质可溶解在适当的缓冲液中,可用于后续实验(2-D电泳、质谱测序等)。
特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!