产品详情
热启动Taq DNA聚合酶(化学修饰法)
HotStart Taq DNA Polymerase
本制品是Taq酶经特殊工艺处理后的制品,经处理后的Taq酶在加热至高温前,其聚合酶活性被抑制,从而抑制低温条件下由引物的非特异性退火或引物二聚体引起的非特异性扩增(图例二)。本制品适用于高特异性PCR反应、Multiplex PCR、高GC含量(>60%),有二级结构等有较强背景的基因组扩增和大规模基因组扩增检测。
产品特点:
1、简便:与目前通用的最有效的热启动酶反应条件一致,不需要改变PCR程序。
2、高效:有效减少了杂带及拖带产生,从而实现高特异性的PCR。
3、灵敏:可从0.05ng人基因组DNA模板中扩增出特定基因片段。(图例一)
产品用途:
1、高特异性PCR反应;
2、复杂模板扩增;
3、Multiplex PCR;
4、基因组扩增检测;
5、荧光定量PCR;
质量保证:经多次柱纯化,SDS-PAGE胶检测仅可见清晰单一的目的条带;PCR方法检测无大肠杆菌DNA残留,无核酸内、外切酶污染。
活性定义:热激活后,在74℃条件下,30分钟内催化10nmol dNTP的掺入反应成为酸不溶性物质所需的酶量为一个单位。
产品组成:
保存温度:-20℃。
使用建议:
1、使用本试剂扩增得到的PCR产物3′端有一突出"A"碱基,可直接克隆于T-vector中。
2、当扩增较长片段时,推荐使用HotStart Taq plus(货号:JN0024),该酶对于较长的DNA片段扩增具有更高的扩增效率及保真度。
应用实例:
图例一) 50μl扩增体系中,以50ng人基因组DNA为模板,HotStart Taq可对特定基因(170bp)进行高特异性扩增。
泳道M:DNA Ladder 2000;泳道1、2:Taq酶1.25U;泳道3、4:Hot Start Taq酶1.25U
图例二)热启动效果检测。左1-6:94度10分钟热激活后,目的基因扩增;
右1-6:无热激活步骤直接PCR。PCR扩增条件:94度5秒->57度20秒->72度20秒,25个循环。结论:未做热激活时,Taq酶活性被完全抑制。(1-6酶用量分别为5U,2.5U,1.25U,0.625U,0.312U,0.156U)
特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!