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上海钦胜生物科技有限公司
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产品详情

本产品是酸酚-氯仿异戊醇的25:24:1的混合液,酸酚是用酸性缓冲液饱和

的苯酚溶液。本产品的pH在4.0-5.0之间,用于RNA提取时去除蛋白质、多

糖、脂类和酚类等杂质。本产品不能用于DNA提取。

苯酚使蛋白质变性,同时抑制了RNase的降解作用。氯仿抽提加速有机相

与液相分层,去除核酸溶液中的迹量酚。异戊醇减少蛋白质变性操作过程中产生

的气泡。使用酚:氯仿:异戊醇抽提离心后的上层为含RNA的水相、中间为变

性蛋白与DNA,下层为有机溶剂相。

由于苯酚与水有一定比例的互溶,所以如果使用非饱和酚,样品中的水分会

进入酚相,样品会丢失。同时水相中也会有少量的酚,这些残留的酚会抑制后续

酶反应。而饱和酚就没有丢失样品的缺点,因为它已经提前充分吸足了水分(饱

和酚中含10%左右的水分) , 因此不会丢失样品。但由于仍然会有少数酚进入水

相,抑制后续反应。

氯仿的作用是让水和酚彻底分开,不互溶,彻底去除水相中的残留苯酚。

异戊醇的作用是降低表面张力,从而减少操作过程(常常有震荡步骤)中气

泡的产生,而这些气泡的表面张力可能会使DNA断裂。另外,异戊醇还有助于

水相和酚相分相,使离心后的上层水相、中间的变性蛋白相及下层有机溶剂相维

持稳定,便于移取上清。