SKOV3/DDP细胞的使用方法与注意事项！

一、细胞简介

平台编号：bio-103896

拉丁属名：SKOV3/DDP

细胞活力：95％（Viability by Trypan Blue Exclusion）

细胞检测：细胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌

培养条件：RPMI-1640(Hyclone)，90%；优质胎牛血清，10%。 气相：空气，95%；二氧化碳，5%； 温度：37℃。

传代方法：建议1:2-1:3 两天换液一次

冻存条件：完全培养基50%+40%FBS+10%DMSO

二、使用方法

客户收到细胞后，请按照以下方法进行操作。

1.收到细胞，请查看瓶子是否有破裂，培养基是否漏出，是否浑浊，如有请尽快和我们联系。

2.如包装完好，取出25cm2培养瓶，75%酒精消毒,拆下封口膜,在显微镜下观察细胞形态是否正常，细胞的贴壁情况以及细胞密度,然后放入37℃，5%CO2细胞培养箱中静置2-3小时，以稳定细胞状态。

3.细胞状态稳定后，弃除培养瓶中大部分液体，只剩5-10ml左右培养液继续培养就可以了，超过80%汇合度时，请按细胞培养条件传代培养。

4.细胞传代

1)吸出25cm2培养瓶中的培养基,用PBS 2-3ml清洗细胞一次；

2)添加0.25%胰蛋白酶消化液约1.5ml至培养瓶中，倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入完全培养液终止消化；

3)用吸管轻轻吹打混匀，按1:2等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的完全培养基至5ml，放入37℃，5%CO2细胞培养箱中培养；

4)待细胞完全贴壁后，培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。

三、注意事项

1.在细胞培养过程中，请注意保持无菌操作；

2.传代培养过程中，胰酶消化时间不宜过长，否则会影响细胞贴壁及其生长状态；

3.该细胞只可用于科研。

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