产品详情
红细胞裂解液
产品简介
我们生产的红细胞裂解液(Red Blood Cell Lysis Buffer),经过优化配方,用于裂解小鼠脾脏等造血组织或者人外周血中悬浮细胞中的红细胞。此溶液中主要有效成分为氯化铵。使在裂解红细胞的同时几乎不损伤淋巴细胞或其它有细胞核的细胞。小鼠胸腺和淋巴结细胞不需要使用此裂解液。本裂解液经过无菌过滤,处理过的血液或组织细胞样品可以用于后续的原代培养、细胞融合以及核酸或蛋白的提取及各种常规的分析和检测。
保存条件:
4℃保存,一年有效。室温保存, 3个月有效。
对于组织细胞样品:
1. 新鲜组织经过消化处理,通过适当方法分散成细胞悬液,收集小鼠脾细胞制备单细胞悬浮液。
2. 4°C 400-500xg 离心弃上清取沉淀。
3. 加入 3-5 倍细胞体积的红细胞裂解液,轻轻吹打混匀,在冰上裂解 4-5 分钟,并且裂解过程
中宜适当偶尔摇动以促进红细胞裂解。例如细胞沉淀的体积为 1ml,则加入 3-5ml 的红细胞
裂解液。本步骤在室温或 4 度操作均可。
4. 4°C 400-500xg 离心 5 分钟,弃红色上清。
5. 如果发现红细胞裂解不完全,可以重复上述步骤 3 和步骤 4 一次。通常极微量的红细胞不会
影响后续的一些检测。
6. 加入适量 PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液,重悬沉淀洗涤 1-2 次,4°C 400-500xg 离心
2-3 分钟,弃上清。洗涤液的用量通常应至少为细胞沉淀体积的 5 倍。
7. 根据实验需要用适当溶液重悬细胞沉淀后即可进行细胞计数,调节密度,进行下一步染色。
对
于血液样品:
1. 取新鲜抗凝血,4°C 400-500xg 离心 5 分钟,离心弃上清。
2. 加入 6-10 倍细胞体积的红细胞裂解液,轻轻吹打混匀,在冰上裂解 4-5 分钟,并且裂解过程
中宜适当偶尔摇动以促进红细胞裂解。例如细胞沉淀的体积为 1ml,则加入 6-10ml 的红细胞
裂解液。
3. 4°C 400-500xg 离心 5 分钟,弃红色上清。
4. 如果发现红细胞裂解不完全,可以重复上述步骤 2 和步骤 3 一次。通常极微量的红细胞不会
影响后续的一些检测。
5. 加入适量 PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液,重悬沉淀洗涤 1-2 次,4°C 400-500xg 离心
2-3 分钟,弃上清。洗涤液的用量通常应至少为细胞沉淀体积的 5 倍。
6. 根据实验需要用适当溶液重悬细胞沉淀后即可进行细胞计数,调节密度,进行下一步染色。
注意:对于微量或少量的血液样品,可以在第一步中不进行离心弃上清的操作,直接在第二步中加
入 10 倍血液体积的红细胞裂解液,并在室温或 4℃裂解 4-5 分钟。对于鼠的血液,裂解 4-5
分钟已经足够,对于人的外周血,宜延长裂解时间至 10 分钟,但通常不宜超过 15 分钟,并
且裂解过程中宜适当偶尔摇动以促进红细胞裂解。后续步骤相同。
特别提示:本公司的所有产品仅用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!