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上海泽叶生物科技有限公司
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BCA蛋白浓度测定试剂盒(含标准品)

产品简介

蛋白质定量是蛋白质研究的基础工作之一。BCA(bicinchoninic acid)是理想的蛋白质定量方法;是当前比Lowry 法更优越的专用于检测总蛋白质含量的产品。该方法以快速灵敏、稳定可靠,对不同种类蛋白质检测的变异系数非常小而倍受专业人士的青睐。BCA 法测定蛋白浓度不受绝大部分样品中的化学物质的影响。在组织细胞裂解实验中,常用浓度的去垢剂SDS,Triton X-100,Tween不影响检测结果,但受螯合剂(EDTA,EGTA)、还原剂(DTT,巯基乙醇)和脂类的影响。实验中,若发现样品稀释液或裂解液本身背景值较高,可试用Bradford蛋白浓度测定试剂盒。该产品不受此影响,因此与之配合使用,可免除您实验中的许多烦恼。该试剂盒在31.25--2000ug/ml浓度范围内有较好的线性关系。

使用说明:

配制工作液: 根据标准品和样品数量,按 50 体积 BCA 试剂 A 加 1 体积 BCA 试剂 B(50:1)配

制适量 BCA 工作液,充分混匀。

2、稀释标准品:将标准品储存液稀释至 31.25~2000ug/ml,推荐使用去离子水或 0.9% NaCl。

管号 稀释液体积 标准品体积 终浓度

A 360ul 240ul(5mg/ml) 2000ug/ml

B 300ul 300ul(从 A 管取) 1000ug/ml

C 300ul 300ul(从 B 管取) 500ug/ml

D 300ul 300ul(从 C 管取) 250ug/ml

E 300ul 300ul(从 D 管取) 125ug/ml

F 300ul 300ul(从 E 管取) 62.5ug/ml

G 300ul 300ul(从 F 管取) 31.25ug/ml

H 300ul 0ul                         0ug/ml(空白)

3、 将 25ul 的标准品和合适浓度范围的样本(比如 5ul 样品+20ul 稀释液)分别添加于 96 孔板的微孔中。

4、 各孔加入 200ul BCA 工作液,充分混匀。

5、 盖上 96 孔板盖,37℃孵育 30 分钟(如果浓度较低,可适当提高孵育温度或延长孵育时间) 。

6、 冷却到室温,用酶标仪测定 A562,根据标准曲线计算出蛋白浓度。

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特别提示:本公司的所有产品仅用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!