MTT细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒

产品简介

1.  MTT细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒(MTT Cell Proliferation and Cytotoxicity Assay Kit)被广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的实验方法。由于细胞活力与细胞数呈正相关，因此常常用来检测细胞的增殖情况。MTT可以被线粒体内的一些脱氢酶还原生成结晶状的深紫色产物formazan。在特定溶剂存在的情况下，可以被完全溶解。然后通过酶标仪可以测定570nm波长附近的吸光度。细胞增殖越多越快，则吸光度越高；细胞毒性越大，则吸光度越低。

2.  本试剂盒采用了独特的Formazan溶解液配方，无需去除原有的培养液，可以直接加入Formazan溶解液溶解formazan。从而避免了由于去除培养液时formazan被部分去除而引起的误差。

3.  本试剂盒背景低，灵敏度高，线性范围宽，使用方便提高了可靠性。

4.  本产品为5000 次（5个96孔细胞培养板）操作。

使用说明：

1.  收集对数期细胞，调整细胞悬液浓度，每孔加入100ul铺板使待测细胞调密度至1000-10000孔，（边缘孔用无菌PBS填充）。

2.  5%CO2，37℃孵育，至细胞单层铺满孔底（96孔平底板，具体每孔所用的细胞的数目，需根据细胞的大小，细胞增殖速度的快慢等决定）。加入浓度梯度的药物，原则上，细胞贴壁后即可加药，或两小时，或半天时间，每孔0-10ul，设3-5个复孔.建议设5个。

3.   5%CO2，37℃孵育16-48小时，倒置显微镜下观察。

4.   每孔加入10微升MTT染色液，继续培养4h。若药物与MTT能够反应，可先离心后弃去培养液，小心用PBS冲2-3遍后，再加入含MTT的培养液。

5.  每孔加入100微升Formanzan溶解液，置摇床上低速振荡10-30min，使结晶物充分溶解(如果仍有部分formazan未溶解，建议用移液器反复轻轻吹打2-3次避免产生气泡或过夜孵育溶解)。在酶联免疫检测仪570nm测定吸光度。如无570nm滤光片，可以使用560-600nm的滤光片。

6.  同时设置调零孔（培养基、MTT染色液、Formanzan溶解液），对照孔（细胞、相同浓度的药物溶解介质、培养液、MTT染色液、Formanzan溶解液）

特别提示：本公司的所有产品仅用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！