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细胞周期检测试剂盒Plus
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产品名称 | 货号 | 规格 | 价格 |
Cell Cycle and Apoptosis Kit Plus(细胞周期检测试剂盒Plus) | ZY-62L553 | 50T | 680 |
细胞周期检测试剂盒升级版(Cell Cycle Assay Kit Plus)采用RedNucleus I染色法检测细胞周期,RedNucleus I是一种远红外核酸染料,具有细胞膜透性,可快速进入活细胞,特异结合DNA,对活细胞进行周期检测,且无需RNase的消化。与传统的碘化丙啶染色(PI staining)方法相比,细胞无需破膜或固定,操作更加简便。
RedNucleus I是一种双链DNA的荧光染料,与双链DNA结合后的荧光强度和双链DNA的含量成正比。可通过流式细胞仪测定细胞内DNA含量,然后根据DNA含量的分布情况,进行细胞周期分析。RedNucleus I 染色后,假设G0/G1期细胞的荧光强度为1,那么含有双份基因组DNA的G2/M期细胞的荧光强度的理论值为2,正在进行DNA复制的S期细胞的荧光强度为1-2之间。此外,RedNucleus I与Horizon BV / BUV、FITC和R-PE等染料兼容,可在样品染色后进行周期检测。
本试剂盒通常应用于培养的贴壁或悬浮细胞的细胞周期检测,如果用于组织的细胞周期检测,则必须先把组织消化成单细胞状态。
产品组分
组分 | 50T |
A.染色缓冲液(10×) | 10 mL |
B.RedNucleus I 染色液 | 200 μL |
运输与保存
蓝冰运输。-20℃保存,组分B需避光保存。有效期24个月。【注】:短期使用请保存于4℃。
操作步骤
1.细胞样品的准备:
(1)(此步骤是针对贴壁细胞,若为悬浮细胞,可直接进行第2步)用胰酶消化细胞,加入细胞培养液,轻轻吹散细胞后,收集到离心管内。
(2)1000 g左右离心3-5 min,沉淀细胞。小心吸除上清,加入约1 mL冰浴预冷的1×的染色缓冲液(将10×的染色缓冲液用diH2O 按1:10 稀释),重悬细胞。重复一次。
(3)1000 g左右离心3-5 min,沉淀细胞。弃上清后,加入1 mL 培养基重悬细胞(对于固定细胞,也可用1×PBS 重悬)。轻轻弹击离心管底以适当分散细胞,避免细胞成团。
2.染色:
(1)每管细胞样品中加入4 μL 的RedNucleus I 染色液,缓慢并充分混匀,室温避光孵育20 min(或在37 ℃避光孵育5-10 min)。
3.流式检测和分析:
(1)用流式细胞仪在638 nm 处激发,推荐在RL3或FL4 通道检测,也可使用RL1、RL2通道检测。采用适当分析软件进行细胞DNA含量分析和光散射分析。
注意事项
1.该产品仅限于科学实验研究使用,不得用于临床诊断、治疗等领域。
2.本产品适用于活细胞和固定细胞周期检测。如需固定,推荐使用冰浴预冷75-80% 的乙醇过夜固定细胞。
3.荧光染料均存在淬灭问题,保存和使用过程中请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。
4.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
特别提示:本公司的所有产品仅用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!