Prescript Ⅱ RT ProMix For qPCR
产品概述
产品保留了完整的PreScript II Reverse Transcriptase蛋白结构, 具有与野生型相同的聚合酶活性, 可用于较长的cDNA合成以及全长cDNA文库的构建等。产品包含合成高质量cDNA所需的所有成分,适合于两步法RT-qPCR检测。2× RT Reaction Mix包含优化的缓冲体系、Oligo (dT)23VN、Random hexamers和dNTPs。此外,产品针对qPCR进行特别优化,比例优化的Random primers/Oligo (dT)23VN primer mix,可以在45 min内高效合成qPCR所用的模板cDNA。
产品内容 组分 | ZY-619A | ZY-619B |
2× RT Reaction Mix | 500 μL | 1 mL |
Prescript Ⅱ Enzyme Mix | 100 μL | 200 μL |
RNase-free ddH2O | 1 mL | 1 mL |
产品优势
更高效的逆转录效率:PreScript II Reverse Transcriptase保留了完整的蛋白结构, 具有与野生型相同的聚合酶活性,提高了逆转录效率
操作简便的预混型试剂:只要添加模板RNA和水,就可以简便高效率地合成cDNA,且重复性良好
宽广的模板使用范围:反应体系中Total RNA的使用范围非常宽广,便于使用
广阔的可定量扩增区间:比例优化的Random primers/Oligo (dT)23VN primer mix可均一、高效地在RNA全序列范围内进行逆转录,因此可得到更广的可定量扩增区域
实验案例
1. 优异的cDNA合成效率
在10 μL反应体系中分别添加HeLa细胞来源的Total RNA 0.5 μg~0.5 pg,分别进行逆转录反应。然后,在Realtime PCR反应液(使用本公司S018产品)中分别添加上述的逆转录反应液各1% (V/V),用Realtime PCR对ACTB和B2M的cDNA量进行定量,然后进行cDNA合成量的比较。结果可见,在探讨的范围内,模板RNA的量和cDNA的得率密切相关,但无论模板RNA量的多寡,仍可维持很高的cDNA合成效率。可见在目的片段浓度有差异的样品之间,逆转录反应效率的变化并不大,因此可将定量结果的误差控制在最小范围内。
2. 强大的逆转录能力
以HeLa细胞Total RNA为模板,选择高、中、低三种表达量的基因,在说明书提供的反应体系及反应条件下进行逆转录,然后用Realtime PCR检测多对基因,结果表明,对不同表达量的基因,本产品都具有优异的逆转录能力。
应用范围
合成用于qPCR的cDNA模板,特别是较长的cDNA合成;全长cDNA文库的构建。
产品存储特别提示:本公司的所有产品仅用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!