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HL-1(小鼠心肌细胞)的使用方法!
HL-1小鼠心肌细胞来源于一个细胞集落不规则没有显著角质化的侵染性鳞状细胞癌。 单层培养的细胞间可以观察到带状连接,也注意到有细胞质张力丝。 1970年发现支原体污染并去除。 肿瘤坏死因子(TNF)α抑制ME-180的生长。 这株细胞含有人乳头瘤病毒(HPV)DNA,与HPV-39的同源性高于HPV-18。
细胞简介
平台编号:bio-107452
规格:1×10?cells/T25培养瓶
拉丁属名:HL-1(小鼠心肌细胞)
细胞名称:HL-1 (小鼠心肌细胞) (种属鉴定正确)
种属:小鼠
年龄(性别):雌
生长特性:贴壁细胞
细胞形态:成纤维细胞样
背景描述:HL-1 Cardiac Muscle Cell Line is an immortalized mouse cardiomyocyte cell line able to continuously divide and spontaneously contract while maintaining a differentiated cardiac phenotype. HL-1 can be serially passaged without losing its differentiated cardiac myocyte phenotype, including morphological, biochemical, and electrophysiological properties. HL-1 is used in a variety of model systems to address questions of cardiac biology at the cellular & molecular levels.
生物安全等级:1
生长培养基:MEM(PM150410)+10% FBS(164210-500)+1% P/S(PB180120)
推荐传代比例:1:4-1:6
推荐换液频率:2~3次/周
冻存条件:冻存液:55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO 温度:液氮
培养条件:气相:空气,95%;CO2,5% 温度:37℃
注意事项:仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用
收到细胞后的使用方法
1、您收到HL-1小鼠心肌细胞后,请按照以下方法进行操作:
取出25cm2培养瓶,75%酒精擦拭培养瓶,拆下封口膜,放入37℃,5%CO2细胞培养箱中静置3-4小时以稳定细胞状态,然后换用新鲜完全培养液继续培养或进行传代。
2、细胞传代:
1)细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时,弃25cm2培养瓶中的培养液,用PBS清洗细胞一次;
2)添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后加入完全培养液终止消化,再轻轻吹打细胞使之脱落,然后将悬液转移至15ml离心管中,1000rpm离心5min;
3)弃上清,沉淀细胞用12ml完全培养基重悬,然后按1:2比例进行分瓶传代,最后放入37℃,5%CO2细胞培养箱中培养;
4)待细胞完全贴壁后,观察培养结果,之后进行换液培养或传代。
3、细胞冻存:
1)细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时,弃25cm2培养瓶中的培养液,用PBS清洗细胞一次;
2)添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后加入完全培养液终止消化,轻轻吹打细胞使之脱落,然后将悬液转移至15ml离心管中,1000rpm离心5min;
3)用适量的冻存液(FBS:DMSO=9 :1)重悬细胞,并放置于冻存管中;
4)先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h,然后将其移入-80℃过夜,24h后转入液氮中进行长期保存。使用程序降温盒可直接放入-80℃。
4、细胞复苏:
1)从液氮中取出细胞冻存管(注意:佩戴防爆管面具),快速将其置入37℃水浴中解冻,直至冻存管中无结晶,然后用75%的酒精擦拭冻存管外壁;
2)将冻存管中的细胞移至含5ml完全培养基的15ml离心管中, 1000rpm离心5min;
3)弃上清,沉淀用5ml完全培养基重悬,接种25cm2培养瓶,于37℃,5%CO2细胞培养箱中培养;
4)第二天,换用新鲜完全培养基继续培养。
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