产品详情
产品说明
大肠杆菌DH5α是一种常用于质粒克隆的菌株，在使用pUC系列的质粒进行转化时，可与载体编码的β-半乳糖苷酶氨基端实现α互补，可用于蓝白斑筛选鉴别重组菌株。基因型：F-,φ80dlacZ△M15,△(lacZYA-argF)U169,deoR,recA1,endA1,hsdR17(rk-,mk+),phoA,supE44,λ-,thi-1,gyrA96,relA1。
产品特点
1.DNA稳定性高。
2.有利于高纯度DNA提取。
3.可用于蓝白斑实验
4.转化效率高达1-3×109cfu/μg
操作步骤
1.取感受态细胞置于冰浴中，放置10分钟。
2.向感受态细胞中加入1-5μl含有1pg-100ng的质粒DNA，轻轻地敲打4-5下。
3.冰浴30分钟，不要震荡。
4.42℃热击45-60秒，不要震荡，迅速转移到冰浴中，放置2分钟。
5.加入950μl室温的SOC培养基。
6.混匀后，置于37℃的摇床上，250rpm震荡培养60min。
7.将含有抗生素的平板加热到37℃，放置半个小时，使其表面干燥，易于均匀涂布。
8.根据实验要求，取适量转化的感受态的细胞，加到含有抗生素的固体琼脂糖培养基上（LB或SOC），用无菌棒将细胞均匀涂开，将平板置于37℃培养箱，倒置过夜培养（8-12h）。
运输和储藏
干冰运输，收到后请置于-80℃。
注意事项
1.刚刚融化的细胞，转化效率最高
2.避免反复冻融
3.避免用移液枪吸吹
4.整个操作过程要轻柔
