stabl3感受态细胞

注意事项：仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用（产品信息以出库为准）

详细信息

产品说明

大肠杆菌Stabl3是由大肠杆菌HB101衍生出来的菌种。该菌种适合于不稳定的片段的克隆，比如包含正向重复的慢病毒。使用pUC19质粒进行检测，转化效率可达1×108cfu/μg以上。基因型：F–mcrB mrr hsdS20(rB–, mB–) recA13 supE44 ara-14 galK2 lacY1 proA2 rpsL20(StrR) xyl-5λ– leu mtl-1。

产品特点

1.适合于慢病毒以及其他逆转录病毒载体的复制。

2.有效降低错误重组。

操作步骤

1.取感受态细胞置于冰浴中，放置10分钟。

2.向感受态细胞中加入1-5μl含有1pg-100ng的质粒DNA，轻轻地敲打4-5下。

3.冰浴30分钟，不要震荡。

4.42℃热击30秒，不要震荡，迅速转移到冰浴中，放置2分钟。

5.加入250μl室温的SOC培养基。

6.混匀后，置于37℃的摇床上，250rpm震荡培养60min。

7.将含有抗生素的平板加热到37℃，放置半个小时，使其表面干燥，易于均匀涂布。

8.根据实验要求，取适量转化的感受态的细胞，加到含有抗生素的固体琼脂糖培养基上（LB或SOC），用无菌棒将细胞均匀涂开，将平板置于37℃培养箱，倒置过夜培养（8-12h）。

运输和储藏

干冰运输，收到后请置于-80℃。

注意事项

1.刚刚融化的细胞，转化效率最高

2.避免反复冻融

3.避免用移液枪吸吹

4.整个操作过程要轻柔