产品详情
产品概述
过氧亚硝基阴离子(ONOO-,Peroxynitrite anion)是活性氧家族的一员,活性氧(Reactive oxygen species, ROS) 包括过氧化氢(H2O2,Hydrogen peroxide)、羟基自由基(•OH,Hydroxyl radical)、单线态氧(1O2,Singlet oxygen)、一氧化氮(NO,Nitric oxide)、超氧阴离子(•O2-,Superoxide anion)、过氧化自由基(ROO• ,Peroxyl radical)、过氧羟自由基(HOO• ,hydroperoxyl)及其下游产物过氧化物过氧亚硝基阴离子(ONOO-,Peroxynitrite anion)、ClO-和羟化物等,参与细胞生长增殖、发育分化、衰老和凋亡以及许多生理和病理过程。 活性氧(reactive oxygen species,ROS)的产生主要是氧化磷酸化的结果,在呼吸链中,在某些位点会有“泄露”的电子直接和氧气或和其他电子受体反应,在酶或非酶作用下引发一系列反应生成不同种类的活性氧:“泄露”的电子最初和氧气反应生成超氧阴离子自由基(O2•-)(图1A)。超氧阴离子遇水生成H2O2(图1B),同时过氧化氢也可由氧气在单胺氧化酶(monoamine oxidase,MAO)的作用下生成(图1C),生成的过氧化氢在髓过氧化物酶(myeloperoxidase, MPO)的催化下与Cl-反应可生成ClO-(图1D),在铁或铜离子的催化下发生Fenton反应生成OH•(图1E),超氧阴离子遇氮氧化物反应生成ONOO-(图1F)。这些生成的高氧化活性的物质统称为活性氧。 血清过氧亚硝基阴离子(ONOO-)检测试剂盒是一种利用新型荧光探针O71进行血清中过氧亚硝基阴离子(ONOO-)检测的试剂盒。本试剂盒中的O71过氧亚硝基阴离子(ONOO-)探针为绿色荧光的过氧亚硝基阴离子探针,具有488 / 516nm的最大激发/发射波长。 O71过氧亚硝基阴离子(ONOO-)探针在血清中过氧亚硝基阴离子(ONOO-)存在的条件下,被氧化生成绿色荧光物质,绿色荧光强度与血清内过氧亚硝基阴离子(ONOO-)水平成正比,检测O71产物的荧光就可以知道血清内过氧亚硝基阴离子(ONOO-)的水平。
保存温度
-20℃ 避光
注意事项
1.长期不用可以-20℃保存。
2.避免反复冻融。
3.需要长期保存时可以根据使用情况进行小量分装后-20℃保存。
4.试剂拆封后请尽快使用完!
有效期
6个月
检测方法
1.荧光分光光度计2.荧光酶标仪
适用样本
血清
产品特点
1.使用方便:可用荧光分光光度计、荧光酶标仪检测;
2.背景低,灵敏度高;
3.线性范围宽,使用方便。
仪器准备
1.荧光分光光度计或荧光酶标仪,
2.离心机
3.移液器
4.冰箱
5.冰盒
试剂准备
纯水或PBS缓冲液或者HBSS
耗材准备
1.离心管
2.吸头
3.一次性手套 4.荧光专用黑色透明底96孔板
使用注意事项
1.螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体收集至管底,避免开盖时液体洒落。
2.O71染色液为DMSO溶液,冬季气温较低时在室温时为凝固状态,极易粘附在管壁、吸头壁。注意需要加热溶解,吸头也需要放在培养箱预热,否者容易再次凝固在吸头内壁产生损耗。
3.使用前,先将本品取出回温至室温,并对其进行简短离心使DMSO溶液集中于管底。
4.尽量缩短探针标记后到测定所用的时间,以减少各种可能的误差。
使用方法
试剂准备:
根据样本数量,用纯水将O71探针10倍稀释。充分混匀,备用。
样本检测:
1. 在96孔板中加入100微升新鲜血清样本、10微升O71探针,用移液器吹打,使之充分混匀。
2. 在37℃避光孵育15-30分钟。
3. 置于荧光光度计或酶标仪中,后于激发波长为488nm、发射波长520nm检测荧光强度。
特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!