产品详情
产品概述
一氧化氮(Nitric Oxide,NO),是一种非常重要的生理性的细胞内及细胞间的信号分子,在免疫、神经及循环等系统中起着重要作用。一氧化氮化学性质活泼,体内代谢转化为硝酸盐(NO3-)和亚硝酸盐(NO2-),此两种浓度之和(NO3-+NO2-)才能准确代表NO水平。 一氧化氮(NO)检测试剂盒利用硝酸还原酶特异性将NO3-还原为NO2-,通过显色反应测定NO2-浓度的高低。本试剂盒检测方法准确性高、灵敏、简便且较稳定,可用于血清、组织匀浆、细胞及细胞培养液、腹水、胸水、脑脊液、胃液、尿液等样本的NO浓度测定。 还可以提供细胞内NO检测试剂盒,可以用荧光法快速检测,准确性、灵敏度更高,可以进行原位检测和高通量检测。 可以提供各种细胞检测试剂盒。包括细胞凋亡、增殖、毒性、活性氧、细胞代谢、氧化应激、细胞膜流动性、膜通透性转换孔、细胞耗氧率、细胞内pH、细胞粘附、细胞自噬等数百种检测试剂盒产品。 可以为您提供各种颜色的M系列、N系列、L系列、E系列、G系列等细胞膜、细胞质、细胞核、溶酶体、线粒体、内质网、高尔基体、骨架、微管等细胞、细胞亚结构荧光染色试剂盒产品,以及钙离子、钠离子、氩离子等各种荧光染色试剂盒产品。 可以提供动物、植物、微生物、酵母、水产、家禽、兽类、土壤等样本的各种生化指标检测的数百种试剂盒产品。
保存温度
2-8℃ 避光
注意事项
1.开盖后组份按要求条件保存。
2.拆封后请尽快使用完!
有效期
3个月
检测方法
酶标仪
适用样本
血清、血浆、尿液、细胞培养上清、细胞裂解液、组织裂解液
仪器准备
1. 酶标仪
2. 恒温水浴锅
3. 离心机
4. 移液器
5. 冰箱
6. 冰盒
试剂准备
纯水
耗材准备
1.离心管
2.吸头
3.一次性手套
使用注意事项
1. 因组织中NO含量较少,组织匀浆一般为10%或20%,且做好的组织匀浆离心速度为2500rpm/min,离心10分钟,转速不可过高,时间不可太长,样本取样量以0.3-0.5ml为宜。
2. 试剂A、试剂B和标准品避免反复冻融,如果需要分多次实验,可以在第yi次实验时将试剂A和试剂B、标准品分装后再保存,根据每次实验时的试剂用量取出使用。
3. 配好的显色剂避光保存。
4. 血清、血浆、组织等样本应新鲜,或者于-80℃以下保存半年以内检测。
5. 所有实验用水均需使用不含NO2-的纯水或双蒸水。
6. 样本与底物反应完毕后,离心,取上清时千万不可将沉淀吸出,否者影响结果。
7. 需使用一次性塑料试管,若没有,使用较新的玻璃管并彻底洗刷干净。
使用方法
试剂配制
1. 混合试剂的配制:
按试剂 A:试剂 B=1:1配制,用多少配多少,配好后充分混合后待用,现用现配,24小时内有效。
试剂 A,试剂 B使用前请放37℃水浴或室温使其溶解后混匀再用。
2. 试剂E工作液配制:
将试剂E加入90~100℃热双蒸水20 mL中,隔水加热充分溶解;4℃避光保存。
【注】:
试剂E为过饱和溶液,所以在配制时最hao用90~100℃热蒸馏水23ml(热胀冷缩)边隔水加热边用玻璃棒搅拌,以使其充分溶解。一次实验用不完再用时可能仍有结晶,用之前可以再次边隔水加热边玻璃棒搅拌使其溶解。
3. 试剂F工作液配制:
使用前将试剂F加入双蒸水8 mL中溶解后备用;4℃避光保存(如颜色变为深咖啡色不可再用)。
4. 显色剂配制:
使用前配制,用多少配多少。试剂 E工作液︰试剂 F工作液︰试剂 G=2.5︰1︰1。若能在一个月内用完者也可一次配成。剩余显色剂避光保存。室温较低时会有结晶析出,再次使用时,放100℃水浴,反复摇动溶解后使用。
5. 100μmoL/L标准工作液配制:
取0.1 mL标准品(10mmoL/L)用双蒸水定容稀释至10mL(即100倍稀释),混匀,即为100μmol/L标准应用液。现配现用。
操作步骤:
(一)、血清、尿液、胃液、细胞培养液等样本检测
1. 操作表:
按下表在离心管中加入试剂
2. 计算公式:
血清、血浆中NO含量计算:
NO含量 = 测定管吸光度值-空白管吸光度值 X 标准品浓度 X 样品测试前
(umol/L) 标准管吸光度值-空白管吸光度值 (100umol/L) 稀释倍数
(二)、组织样本检测
1. 操作表:
按下表在离心管中加入试剂
2. 组织样本NO含量计算:
NO含量 = 测定管吸光度值-空白管吸光度值 X 标准品浓度 ÷ 样品蛋白浓度
(umol/gprot) 标准管吸光度值-空白管吸光度值 (20umol/L) (gprot/L)
【注】:
umol/gprot为微摩尔/克蛋白。
标准品浓度(20umol/L)----标准管中加入100 μl蒸馏水,加25 μl的100μmoL/L标准工作液,相当于5倍稀释,所以此处标准浓度为20umol/L。
特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!