产品详情
产品概述
细胞膜染色试剂DiD是红色荧光标记的细胞膜探针,具有646nm / 663nm的zui大激发/发射波长。 DiD通过与膜结构的脂质分子结合而标记细胞,具有良好的染料维持性,有着强而稳定的红色荧光(Ex/Em=646/663nm),与绿色荧光染料具有良好的荧光分辨性,适合做多重指标染色。工作浓度下,此染料无细胞毒性,不会影响细胞活力以及增殖能力。 M系列细胞膜探针具有多种颜色可以选择,可根据情况对样品进行多色标记实验。除了本试剂盒的橙色荧光探针,还可以提供红色、绿色、深红色等颜色的染色试剂盒。 可以提供细胞凋亡、增殖、毒性、活性氧、细胞代谢、氧化应激、细胞膜流动性、膜通透性转换孔、细胞耗氧率、细胞内pH、细胞粘附、细胞自噬等数百种检测试剂盒产品。 可以为您提供各种颜色的M系列、N系列、L系列、E系列、G系列等细胞膜、细胞质、细胞核、溶酶体、线粒体、内质网、高尔基体、骨架、微管等细胞、细胞亚结构荧光染色试剂盒产品,以及钙离子、钠离子、氩离子等各种荧光染色试剂盒产品。 可以提供动物、植物、微生物、酵母、水产、家禽、兽类、土壤等样本的各种生化指标检测的数百种试剂盒产品。 以96孔板每孔200ul染色液计,本试剂盒可以染色1000-5000个样本。
保存温度
-20℃ 避光
注意事项
1.染料长期不用可以-20℃保存。避免反复冻融。
2.染色液A为DMSO溶液,冬季气温较低时为凝固状态,极易粘附在管壁、吸头壁。注意需要加热融解,变成液体状态后离心至管底部再开盖。
3.可以用手捂住使其融解或37℃短时间水浴。吸头也需要放在培养箱预热,否者容易再次凝固在吸头内壁产生损耗。
有效期
6个月
检测方法
荧光显微镜/激光共聚焦
适用样本
动物细胞
产品应用
荧光显微镜/激光共聚焦
仪器准备
1.荧光显微镜/激光共聚焦
2.离心机
3.移液器
4.冰箱
5.冰盒
试剂准备
1.PBS缓冲液 2.HBSS
耗材准备
1.离心管
2.吸头
3.一次性手套
使用注意事项
1.螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体收集至管底,避免开盖时液体洒落。
2.染色液为DMSO溶液,冬季气温较低时在室温时为凝固状态,极易粘附在管壁、吸头壁。注意需要加热溶解,吸头也需要放在培养箱预热,否者容易再次凝固在吸头内壁产生损耗。
3.使用前,先将本品取出回温至室温,并对其进行简短离心使DMSO溶液集中于管底。
4.细胞处理需要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。
5.标记的条件因细胞种类而异,根据不同样本的实际染色结果做相应调整,在每次实验前,请先根据不同的实验要求、细胞类型、细胞的膜通透性等进行优化,确定zui佳条件。
6.以下方法仅供参考,根据需要使用,或者参考文献的使用方法。
7.染色后立即进行分析。
8.本染色液可用于细胞涂片、细胞的检测。
使用方法
1. 染色工作液的配制:
根据样本数量,用HBSS或相应的无血清培养基或其他缓冲液将探针DiD进行500-5000倍稀释,配制成染色工作液。
2. 细胞染色
悬浮细胞染色
1) 用PBS洗涤细胞2次。
2) 加入适量体积的染色工作液重悬细胞,使其密度大约为1×106/mL。
3) 在37 ℃孵育细胞 5~20分钟,不同的细胞zui佳培养时间不同。可以用20分钟作为起始孵育时间,之后优化体系以得到均一的标记结果。
4) 孵育结束,500 g离心5分钟。
5) 倾倒上清液,再次缓慢加入37℃预热的培养基重悬细胞。
6) 重复(4),(5)步骤两次以上
贴壁细胞染色
1) 用PBS洗涤细胞2次。
2) 细胞培养板中或细胞爬片上加入适量体积的染色工作液。
3) 37 ℃孵育细胞 5~20分钟,不同的细胞zui佳培养时间不同。可以用20分钟作为起始孵育时间,之后优化体系以得到均一的标记结果。
4) 吸干染色工作液,用培养液洗培养板或盖玻片2~3次,每次用预热的培养基覆盖所有细胞,孵育5~10分钟,然后吸干培养基。
3. 用激光共聚焦/荧光显微镜或流式细胞仪检测
激发波长为646nm,zui大发射波长为663nm。
特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!