产品详情
产品概述
植物种子蛋白提取试剂盒提供全套试剂,适用于从各种高淀粉含量的植物种子样品中提取可溶性蛋白。如水稻、荞麦、玉米、小麦等。提取过程简单方便。 本试剂盒中不含有EDTA,与金属螯和层析等下游应用兼容。
保存温度
2-8℃
注意事项
1.蛋白酶抑制剂未开盖使用前也可以2-8℃储存。开盖使用后-20℃储存。
2.蛋白酶抑制剂在2-8℃低温时是固体状态,从冰箱取出后恢复至室温或37℃短时间水浴,变成液体状态后离心至管底部再开盖。
3.试剂拆封后请尽快使用完!
有效期
一年
检测方法
WB,IP等
适用样本
植物种子
产品应用
WB,IP等
仪器准备
1.离心机
2.振荡器
3.匀浆机/匀浆器
4.涡旋混匀器
5.移液器
6.冰箱
7.冰盒
试剂准备
1.PBS缓冲液
2.蛋白定量试剂盒
耗材准备
1.离心管
2.吸头
3.一次性手套
使用注意事项:
? 旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体甩至管底,避免开盖时液体洒落。
? 蛋白酶抑制剂在2-8℃时是固体状态,从冰箱取出后恢复至室温或37℃短时间水浴,变成液体状态后离心至管底部再开盖。
? 实验过程中的所有试剂须预冷;所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。
? 蛋白酶抑制剂储存期间溶液如果出现沉淀,不影响使用,溶解后正常使用。
? 如果试剂盒不能短时间内用完,蛋白酶抑制剂混合物不可以一次全部加入提取液。
? 可以根据自己实验需要加入其它蛋白酶抑制剂单品。
? 下游实验如果是进行特定蛋白酶或磷酸酶的酶活性检测,提取液可以不加蛋白酶抑制剂或磷酸酶抑制剂,注意提取过程保持低温操作,缩短离心时间。
使用方法
1. 将适量待提取种子样本剥皮,用PBS或纯水洗涤3次。
2. 将样本置研钵液氮充分研磨。
3. 加入1 ml蛋白提取液A充分混匀,移入离心管。
4. 将离心管置振荡器轻轻振荡30分钟-60分钟。
5. 在4℃,15000×g离心20分钟。
6. 收集上清,弃沉淀。
7. 在900 μl上清液体样本中加入100 μl试剂B,充分混匀。
8. 冰浴或4℃冰箱静置30分钟以上。
9. 在4℃,15000×g以上条件下离心15分钟。
10. 小心移除上层清液丢弃,留沉淀。
11. 将离心管倒置在吸水纸上干燥离心管。
12. 加入200 μl试剂C到离心管中。
13. 在4℃,15000×g以上条件下离心15分钟。弃上清,留沉淀。
14. 将离心管倒置在吸水纸上干燥离心管。
15. 用40 μl - 100 μl试剂D溶解蛋白沉淀,充分混匀。
16. 在4℃,10000×g条件下离心10分钟。
17. 收集上清用于下游实验。
特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!