产品概述

支原体膜蛋白提取试剂盒是一种方便高效的高产膜蛋白提取试剂盒。支原体膜蛋白提取试剂盒可以从各种支原体中提取总膜蛋白，可用于纯化蛋白的粗品制备及膜蛋白制备。提取过程简单方便。该试剂盒含有蛋白酶抑制剂混合物，阻止了蛋白酶对蛋白的降解，为提取高质量的蛋白提供了保证。 该试剂盒提取的蛋白具有天然活性，提取的蛋白可用于Western Blotting、蛋白质电泳、免疫共沉淀、质谱等各种下游蛋白研究。 本试剂盒中不含有EDTA，与金属螯和层析等下游应用兼容。

保存温度

2-8℃

注意事项

1.蛋白酶抑制剂未开盖使用前也可以2-8℃储存。开盖使用后-20℃储存。

2.蛋白酶抑制剂在2-8℃低温时是固体状态，从冰箱取出后恢复至室温或37℃短时间水浴，变成液体状态后离心至管底部再开盖。

3.试剂拆封后请尽快使用完！

有效期

一年

检测方法

WB,IP等

适用样本

支原体

产品特点

1.使用方便，将蛋白提取的时间缩短至1小时。

2.含蛋白稳定剂，提取的蛋白稳定。

3.紫外检测蛋白浓度时，背景干扰低。

4.蛋白酶抑制剂抑制了蛋白的降解，蛋白酶抑制剂配方优化。蛋白酶抑制剂混合物包含6种独立的蛋白酶抑制剂；每一种抑制剂可特异性抑制某一种或几种蛋白酶活性。该混合物优化的组成使其可以抑制几乎所有重要的蛋白酶活性，包括丝氨酸蛋白酶、半胱氨酸酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶、丙氨酰-氨基肽酶等。

5.本品不含EDTA，可以用于金属螯合层析等下游应用。

产品应用

WB,IP等

仪器准备

1.离心机

2.振荡器

3.涡旋混匀器

4.移液器

5.冰箱

6.冰盒

试剂准备

1.PBS缓冲液

2.蛋白定量试剂盒

耗材准备

1.离心管

2.吸头

3.一次性手套

使用注意事项：

? 旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。

? 蛋白酶抑制剂在2-8℃时是固体状态，从冰箱取出后恢复至室温或37℃短时间水浴，变成液体状态后离心至管底部再开盖。

? 实验过程中的所有试剂须预冷；所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。

? 蛋白酶抑制剂储存期间溶液如果出现沉淀，不影响使用，溶解后正常使用。

? 如果试剂盒不能短时间内用完，蛋白酶抑制剂混合物不可以一次全部加入提取液。

? 可以根据自己实验需要加入其它蛋白酶抑制剂单品。

? 下游实验如果是进行特定蛋白酶或磷酸酶的酶活性检测，提取液可以不加蛋白酶抑制剂或磷酸酶抑制剂，注意提取过程保持低温操作，缩短离心时间。

使用方法

1. 提取液准备：

每500ul提取液A中加入2ul蛋白酶抑制剂混合物，充分混匀后置冰上备用。

2. 收集好的支原体样本用PBS洗涤后，加入300-500ul冷的提取液A，充分混匀。

3. 置2-8℃条件下振荡30分钟-2小时。至支原体裂解完全，沉淀体积明显减少。

4. 将提取液在2-8℃低温下12000×g离心5分钟，取上清。

5. 在上清中加入3-5ul提取液B，充分混匀。

6. 在37℃水浴10分钟。

7. 在37℃， 1000×g离心3分钟。

8. 此时液体分为2层，小心移除上层溶液，留管底部下层大约30-50ul液体。

9. 用1-2倍体积的膜蛋白溶解液C溶解该溶液，即得支原体膜蛋白样品。

10. 该样品可以用BCA方法进行定量，调整相应的浓度用于下游实验。

特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！