产品详情
产品概述
骨组织总蛋白提取试剂盒(2D电泳用)适用于从各种骨组织样本中提取总蛋白。可以提取各种密质骨与松质骨、软骨组织样品。可以用于新鲜骨组织样本或脱钙骨组织样本。提取过程简单方便,可在1小时内完成。 本试剂盒含有的蛋白酶抑制剂混合物,阻止了蛋白酶对蛋白的降解,为提取高纯度的蛋白提供了保证。
保存温度
2-8℃
注意事项
1.蛋白酶抑制剂未开盖使用前也可以2-8℃储存。开盖使用后-20℃储存。
2.蛋白酶抑制剂在2-8℃低温时是固体状态,从冰箱取出后恢复至室温或37℃短时间水浴,变成液体状态后离心至管底部再开盖。
3.试剂拆封后请尽快使用完!
有效期
一年
检测方法
WB,IP等
适用样本
骨组织
产品应用
WB,IP等
仪器准备
1.离心机
2.振荡器
3.涡旋混匀器
4.移液器
5.冰箱
6.冰盒
试剂准备
1.PBS缓冲液
2.蛋白定量试剂盒
耗材准备
1.离心管
2.吸头
3.一次性手套
使用注意事项:
? 旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体甩至管底,避免开盖时液体洒落。
? 蛋白酶抑制剂储存期间溶液如果出现沉淀,不影响使用,溶解后正常使用。
? 可以根据自己实验需要加入其它蛋白酶抑制剂单品。
? 离心机转速有相对离心力(RCF,×g)和每分钟转速(RPM,r/min)两种表示方式,有些离心机设置有RPM和×g显示切换,但部分离心机没有自动切换功能。需要用下面的公式进行换算:
g=r×1.118×10-5×rpm2 (r 为有效离心半径,即从离心机轴心到离心收集管底部中心位置的长度,单位为厘米) 例如: 转速为3000rpm,有效离心半径为10 cm,则相对离心力(RCF,×g)为=10×1.118×10-5×30002=1006.2(×g)。
使用方法
1. 提取液制备:
根据样本数量,按每400 μl冷的骨组织蛋白提取液中加入2 μl蛋白酶抑制剂,混匀后置室温备用。
2. 取新鲜骨组织样品,在4℃,用pH7.4的PBS缓冲液或生理盐水中充分浸泡。换新鲜生理盐水/PBS再次充分浸泡,然后用纯水清洗,去除血液,红细胞。
3. 将骨组织剪碎,称重后放入装有液氮的研钵中,将骨组织磨成粉末,保持液氮不能完全挥发。
4. 将骨组织粉末加入离心管中,按每200 mg骨组织加入400 μl蛋白提取液。
5. 混匀后在室温条件下振荡30分钟。
6. 在80-100 w,5 s超声/5 s间隔条件下冰浴超声20次。
7. 在4℃,12000×g条件下离心10分钟。
8. 将上清吸入另一预冷的干净离心管,即得到骨组织总蛋白。
9. 上述蛋白提取物直接用于下游实验或分装后于-80℃冰箱保存备用。
特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!