产品详情
产品概述
细菌总蛋白提取试剂盒(双向电泳用)可以从各种细菌样本中提取总蛋白,提取过程简单方便。 本试剂盒适用于各种革兰氏阳性菌和阴性菌样本。 该试剂盒含有蛋白酶抑制剂混合物,阻止了蛋白酶对蛋白的降解,为提取高质量的蛋白提供了保证。 本试剂盒提取的蛋白不含盐,可直接用于2D电泳。 如下游实验不需要直接用于等电聚焦、双向电泳等,可选用用于Western Blotting、蛋白质电泳、免疫沉淀、ELISA、转录活性分析、Gel shift凝胶阻滞实验、酶活性测定等下游蛋白研究实验的试剂盒。 可以提供各种蛋白质提取、裂解、酶活测定、细胞器分离、免疫组织化学、蛋白表达、蛋白标记等蛋白质相关试剂盒产品。
保存温度
2-8℃
注意事项
1.蛋白酶抑制剂未开盖使用前也可以2-8℃储存。开盖使用后-20℃储存。
2.蛋白酶抑制剂在2-8℃低温时是固体状态,从冰箱取出后恢复至室温或37℃短时间水浴,变成液体状态后离心至管底部再开盖。
3.试剂拆封后请尽快使用完!
有效期
一年
检测方法
WB,IP等
适用样本
细菌
产品应用
WB,IP等
仪器准备
1.离心机
2.振荡器
3.涡旋混匀器
4.移液器
5.冰箱
6.冰盒
试剂准备
1.PBS缓冲液
2.蛋白定量试剂盒
耗材准备
1.离心管
2.吸头
3.一次性手套
使用注意事项:
? 旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体甩至管底,避免开盖时液体洒落。
? 蛋白酶抑制剂在2-8℃时是固体状态,从冰箱取出后恢复至室温或37℃短时间水浴,变成液体状态后离心至管底部再开盖。
? 实验过程中的所有试剂须预冷;所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。
? 蛋白酶抑制剂储存期间溶液如果出现沉淀,不影响使用,溶解后正常使用。
? 如果试剂盒不能短时间内用完,蛋白酶抑制剂混合物不可以一次全部加入提取液。
? 可以根据自己实验需要加入其它蛋白酶抑制剂单品。
使用方法
1. 提取液的准备:
根据所需要提取的样本量,每500 μl蛋白提取液中A加入5 μl试剂B和2 μl蛋白酶抑制剂混合物,充分混匀。
2. 在 12000×g条件下将菌液离心5分钟,弃上清,尽量吸干剩余液体,收集菌体。
3. 用PBS洗菌体2次。若为冷冻菌体直接进行下面操作步骤即可。
4. 按每100 mg湿重菌体样本加入500 μl裂解液,吹打混匀,2-8℃振荡20-30分钟。
5. 在150 w-300 w,10 s超声/10 s间隔条件下冰浴超声至菌液变清。
6. 在4℃, 12000×g条件下将菌液离心5分钟,将上清移入冷的干净离心管。
7. 即得到细菌总蛋白样品。
8. 将总蛋白样品定量后分装置于-80℃冰箱或直接用于下游实验。
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