产品详情
产品概述
变性蛋白裂解液采用优质原料配制,对动物细胞胞膜、胞浆、胞核成分均有较强裂解作用,是经典常用的细胞组织快速裂解液。 变性蛋白裂解液含有SDS,裂解得到的蛋白样品可以用于常规的Western等下游实验,不可用于co-IP实验。如下游需要直接用于co-IP实验,请使用其他货号的裂解液。 变性蛋白裂解液中已含常用磷酸酶抑制剂。 可以提供针对动物细胞、组织、植物、真菌、酵母、微生物、藻类、液体、土壤等各种不同样本的蛋白提取试剂盒。 可以提供针对细胞膜、核、胞质、线粒体、溶酶体、高尔基体、内质网、外泌体等细胞不同部位的蛋白提取试剂盒。 可以提供针对下游实验不同应用的试剂盒,例如用于Western Blotting和双向电泳等不同下游应用的试剂盒;含去垢剂成分和不含去污剂成分的蛋白提取试剂盒;专用于蛋白质谱检测、Pull-down实验的试剂盒等总计300多种蛋白提取试剂盒供选择使用。 还可以提供针对动物、植物等不同样本的细胞核、线粒体、溶酶体、叶绿体、外泌体等不同细胞器的提取试剂盒。
保存温度
2-8℃
注意事项
1.蛋白酶抑制剂未开盖使用前也可以2-8℃储存。开盖使用后-20℃储存。
2.蛋白酶抑制剂从冰箱取出后恢复至室温或37℃短时间水浴,变成液体状态后离心至管底部再开盖。
3.试剂拆封后请尽快使用完!
有效期
1年
检测方法
WB、IP等
适用样本
细胞、组织
产品应用
WB、IP等
仪器准备
1.离心机
2.振荡器
3.涡旋混匀器
4.移液器
5.冰箱
6.冰盒 7.匀浆机/匀浆器
试剂准备
1.PBS缓冲液 (pH7.4,实验室常用的10mM磷酸缓冲盐溶液(1X)) (phosphate buffer saline/Dulbecco’s PBS:约含8mM Na2HPO4、2mM KH2PO4、137mM NaCl和3mM KCl)
2.蛋白定量试剂盒
耗材准备
离心管
吸头
一次性手套
使用注意事项
1.旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体甩至管底,避免开盖时液体洒落。
使用方法
A. 细胞裂解
1. 裂解液制备:每1ml冷的裂解液中加入4ul蛋白酶抑制剂混合物,混匀后置冰上备用。
2. 取5-10×106个细胞,在4℃,1000×g条件下离心5-10分钟,小心吸取培养基,尽可能吸干,收集细胞。
3. 用冷PBS洗涤细胞两次,每次洗涤后尽可能吸干上清。
4. 每5×106个细胞中加入500ul冷的裂解液(每106个细胞,大约10mg或10ul压积,加100ul 裂解液。大约相当于6孔板的每孔加入100ul~150ul,或一个75 cm2培养瓶加1 ml。裂解液和细胞应充分接触。如果裂解液不足量,细胞裂解效率将会降低),混匀后,在4℃条件下振荡15-20分钟。
5. 在4℃,12000×g条件下离心15分钟。
6. 将上清吸入另一预冷的干净离心管,用于下游实验。
B. 组织裂解
1. 裂解液制备:每1ml冷的裂解液加入4ul蛋白酶抑制剂混合物,混匀后置冰上备用。
2. 取100mg组织样本剪碎,加入1ml裂解液,用组织匀浆器匀浆至无明显肉眼可见固体。
3. 将组织匀浆吸入另一预冷的干净离心管中,在4℃条件下振荡15-20分钟。
4. 在4℃,12000×g条件下离心5分钟。
5. 将上清吸入另一预冷的干净离心管,用于下游实验。
6. 上述蛋白提取物可分装后于-80℃冰箱保存备用。
特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!