产品详情
产品概述
在组织切片过程中,一些组织内含有骨质或钙化灶时,含钙的组织不宜直接用石蜡包埋切片。这是因为钙和石蜡之间的密度不同,较难切出完整的切片。对含钙组织最hao固定之后,再进行脱钙或二者同时进行。然后进行下游操作如脱水、透明、浸蜡、包埋、切片。用于脱钙的试剂很多,脱钙剂包括有机酸、无机酸、乙二胺四乙酸(EDTA)以及电解法脱钙。 EDTA是一种相对较好的螯合脱钙剂,对组织结构影响最小,可以较好的保存组织的某些酶类,经EDTA脱钙后的组织可以进行免疫组化和原位杂交染色。但是该法脱钙速度太慢,一般脱需要数周至数月。EDTA脱钙液主要由EDTA、磷酸盐等组成, pH值为7.2。 其优点是: ① 经EDTA脱钙的组织染色结果好; ② 对组织的结构损害小。 其缺点是: ① 脱钙速度很慢,不适合常规标本脱钙使用; ② 脱钙后组织会稍微变硬; ③不宜用化学方法确定脱钙终点。可以提供针对动物细胞、组织、植物、真菌、酵母、微生物、液体、土壤等各种不同样本的蛋白提取试剂盒。可以提供针对不同下游实验应用的试剂盒,例如用于Western Blotting和双向电泳等不同下游应用的试剂盒;含去垢剂成分和不含去污剂成分的蛋白提取试剂盒;专用于蛋白质谱检测、Pull-down实验的试剂盒等总计300多种蛋白提取试剂盒可供选择。还可以提供针对动物、植物等不同样本的细胞核、线粒体、溶酶体、叶绿体、外泌体等不同细胞器的提取试剂盒。
保存温度
室温保存
注意事项
1.开盖后组份按要求条件保存。
2.拆封后请尽快使用完!
有效期
一年
仪器准备
1.加热装置或微波炉振荡器
试剂准备
1.PBS缓冲液
2.蒸馏水
耗材准备
1. 离心管
2. 吸头
3. 一次性手套
使用注意事项
1.厚度5mm的骨组织脱钙时间一般脱钙10~30天即可,大多数在14~60天即可;
2.适当加温能加快脱钙的速度,一般不应超过37-40℃;
3.温度过高易导致骨组织松散解体,尤其不可高于60℃;
4.脱钙应彻底,防止脱钙不足或过度。脱钙程度应控制在不影响组织切片的同时尽量缩短脱钙时间,以免脱钙时间过长引起组织损伤;
5.脱钙用具尽量使用玻璃容器,避免金属容器;
6.骨组织脱钙应先固定,然后再脱钙或脱钙固定同时进行;不应脱钙后再固定,以减少对组织的损伤;
7.每隔一段时间检查下脱钙程度;脱钙过度会增加组织的损伤,影响染色结果。
使用方法
以下方法仅供参考,根据实际样本和参考文献情况进行调整。
1. 骨组织脱钙时,取材不易过厚,一般大约5mm。
2. 组织固定后,用PBS清洗3次,每次20min。
3. 组织用蒸馏水洗清洗3次,每次20min。
4. 组织转移至20~30倍体积的EDTA脱钙液中,脱钙10~30天或更长时间。如果想加快脱钙速度,可以置于37℃进行脱钙。如果必要,更换新的EDTA脱钙液继续脱钙,多数组织脱钙2周~3个月即可,每周更换一次直至终点。亦可采用微波快速脱钙法:微波炉设在200W左右的档位,每次加热5min,依据组织厚度和密度重复3~5min,中间间隔3~5min。
5. 用蒸馏水冲洗数次。
6. 常规脱水、包埋。
脱钙终点的测定(物理方法):
采用针刺、手掐、钳夹等方法,当骨组织变软或针刺时没有阻力感即可终止脱钙。
物理检测会对组织结构有一定的损害,尽量避免用力过大或反复检测。
特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!