产品详情
土壤 β-葡萄糖苷酶(S-β-GC)活性检测试剂盒说明书
微量法
规格:100T/48S
产品组成:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致
溶液的配制:
1、 试剂一:自备甲苯;
2、 试剂二:临用前每瓶加入 13 mL 蒸馏水,充分溶解备用,用不完的试剂仍-20℃保存;
3、 标准液:5 mmol/L 的对硝基苯酚溶液;
4、 标准液的准备:取 100 μL 标准液,加入到 400 μL 试剂三中,得到 1 mmol/L 标准液,再用蒸馏水十倍稀释到 100 μmol/L。
产品简介:
S-β-GC 能够催化水解芳基或烃基与糖基原子团之间的糖苷键生成葡萄糖,是纤维素分解酶系中重要组成成分之一,在土壤微生物的糖类代谢方面具有重要生理功能。
S-β-GC 能够催化对-硝基苯-β-D 吡喃葡萄糖苷生成对-硝基苯酚,产物略显黄色,在 400nm 有特征光吸收。
注意:实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品:
可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、恒温培养箱、水浴锅、可调式移液器、微量玻璃比色皿/96 孔板、30-50目筛、冰、研钵、甲苯(不允许快递)和蒸馏水。
操作步骤:
一、样品处理(可适当调整待测样本量,具体比例可以参考文献)
新鲜土样自然风干或 37 度烘箱风干,过 30~50 目筛。
二、测定步骤
1、 分光光度计或酶标仪预热 30min 以上,调节波长至 400nm,蒸馏水调零。
2、 用蒸馏水倍比稀释:50、25、12.5、6.25μmol/L。100、50、25、12.5、6.25μmol/L 做标准液。
3、 加样表:
三、S-β-GC 酶活的计算
1、标准曲线建立:
根据标准管的浓度(y)和吸光度 ΔA=A 标准管-A 空白管(x),建立标准曲线。根据标准曲线,将 ΔA(x)带入公式计算样本浓度(μmol/L)。
2、S-β-GC 酶活的计算:
单位的定义:每天每 g 土样中产生 1μmol 对-硝基苯酚定义为一个酶活力单位。
S-β-GC 酶活(U/g 土样)=y×V 反总÷W÷T=0.36×y
T:反应时间,1h=1/24d;V 反总:反应体系总体积:3×10-4L;W:样本质量,0.02g。
特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!