产品详情
甘油三酯(TG)含量检测试剂盒说明书
微量法
规格:100T/96S
产品组成:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致
溶液的配制:
1、 试剂一:自备玻璃空瓶,正庚烷和异丙醇按体积比 1:1 混合,盖紧后混匀;
2、 标准品:临用前加 5 mL 试剂一,即 1 mg/mL 甘油三酯标准溶液,4℃保存。
产品说明:
TG 是长链脂肪酸和甘油形成的脂肪分子,不仅是细胞膜的主要成分,也是重要呼吸底物。测定原理:用异丙醇抽提取 TG,KOH 皂化 TG 后水解生成甘油及脂肪酸,过碘酸氧化甘油生成甲醛,在氯离子存在下甲醛与乙酰丙酮缩合生成黄色物质,在 420nm 有特征吸收峰,其颜色的深浅与 TG 含量成正比。
技术指标:
最 低检出限:0.0372 mg/mL
线性范围:0.0625-3 mg/mL
注意:实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品:
可见分光光度计/酶标仪、研钵/匀浆器、微量玻璃比色皿/96 孔板、水浴锅、可调式移液枪、正庚烷、异丙醇、蒸馏水、玻璃空瓶。
操作步骤:
一、样本处理(可适当调整待测样本量,具体比例可以参考文献)
1、 组织:按照组织质量(g):试剂一体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL试剂一)进行冰浴匀浆,8000g,4℃离心10min,取上清待测。
2、 细胞、细菌:先收集 400-500 万细胞或细菌到离心管内,离心弃上清,加 1mL 试剂一,超声波破碎 1min(强度 20%,超声 2s,停 1s),8000g,4℃离心 10min,取上清待测。
3、 血清(浆)等液体样本:直接测定。
二、测定步骤
1. 分光光度计/酶标仪预热 30min,调节波长到 420 nm,蒸馏水调零。
2. 水浴锅预热到 65℃。
3.甘油三酯含量测定:
三、TG 计算公式
注意事项:
1. 试剂盒中有易挥发性物质,实验过程中需佩戴手套和口罩,试剂瓶盖打开后应该及时盖紧。
2. 加试剂二后需反复剧烈振荡,使待测液中甘油三酯得到充分提取,振荡幅度、时间、反复次数以及等待分层时间均应保证一致。
3. 为保证试验的重复性,每次水浴后的冷却时间要统一。
4. 若测定管 OD 值大于 1.5 时,建议将样本用试剂一适当稀释后再进行检测,并在计算时需乘以相应的稀释倍数。
特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!